分光光度计测得负值原因

今天给大家分享分光光度计测得负值原因，其中也会对分光光度计出现负数的原因的内容是什么进行解释。

简述信息一览：

• 1、生化实验分光光度法中可能导致吸光度值为负的原因
• 2、分光光度计吸光度为负数是怎么了?
• 3、用可见分光光度计测吸光度时为什么出现负值?
• 4、分光光度计测出负值是什么原因,我的空白对照组是1.5ml蒸馏水加1.5mlTB...

生化实验分光光度法中可能导致吸光度值为负的原因

很多情况都有可能造成负值。例如：测定管加入试剂错误；分光光度计不稳定，数据漂移；比色时未倒够比色杯的2/3；比色杯放置面错，毛面朝光；试管、移液管不洁净；移液管混用；所用试剂过期；加热温度过高等等，这些都有可能导致出现负值。

在分光光度法中，常利用空白溶液来调节仪器的吸光度零点，或用来抵消某些测定的干扰因素。在生化分析仪测定中，除了***用双或多波长、两点法等排除背景干扰外，常要运用专门空白测定，以便从样品测定吸光度中扣除其影响。正确选择空白校正，对提高准确度起重要作用。

原理不同：（1）紫外分光光度计，就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。（2）荧光分光光度法是根据物质的荧光谱线位置及其强度进行物质鉴定和含量测定。可根据不同的物质其组成与结构调整所吸收的紫外-可见光波长和发射光的波长。

有的，有的实验直接用蒸馏水做参比的。例如，测定空气中的甲醛含量的酚试剂分光光度法（GB/T18202-2014），就是用蒸馏水为参比溶液，当空白溶液；测定氨的含量的参比溶液，就是用“无氨水”为参比溶液为空白溶液。

此两点既不是反应起始点也不是终点。主要用于检测一些非特异性的项目，如肌酐。连续监测法（动力学法、速率法）：是在测定酶的活性或酶代谢产物时，连续取反应曲线中呈线性变化吸光度值（△；A/min）来计算结果。因在反应线性时间内各点间的吸光度差值为零故又称谓零级反应。

在用血清而非试剂作空白时，大颗粒TRL散射引起假性高基线吸收。随着反应的进行，TG被水解，脂蛋白颗粒变小，浊度也减小，总的效应是在吸光度上升（产生NADH）的反应中，结果轻微偏低。这种误差所占比率较小，且只发生于高浓度TG标本中，其误差通常是可接受的。

分光光度计吸光度为负数是怎么了?

1、这个极有可能，可能原因，供你参考：确认是否进行 零点校准，可选择蒸馏水或者 你所使用的蒽酮溶液；然后校准100%就可以了，正常情况下，吸光度值应该是正值。

2、在多组分体系中，如果各组分的吸光质点彼此不发生作用，那么吸光度便等于各组分吸光度之和，这一规律称吸光度的加和性。据此可以进行多组分同时测定及某些化学反应平衡常数的测定。

3、你的空白水样测的不准。你的污水水样比空白水样COD要低。你的空白水样被污染。吸光度调到500，你调对了吗？标零时出现问题。

4、只有把空白和待测比色杯的位置放反了，才会出现负吸光度。正确用法是以空白液作基准（调零和满度），再测待测液。

5、分光属于强检项目，应该要技术部门检定，看机器是否有问题，校准后在试试看；不回0，调不到100都是不行的。要不查一下干燥剂，是不是受潮了。

6、就负一点，情况有：本身杯差造成的；确实没有待测离子，仪器轻微的波动造成的。问题六：用可见分光光度计测吸光度时为什么出现负值 我做邻二氮杂菲测铁的时候也遇到过，做第一份的结果为负值，以后几次恢复正常。比色皿必须配套使用，无论玻璃比色皿还是石英比色皿，不能混用。

用可见分光光度计测吸光度时为什么出现负值?

有可能是你的基线没有校正吧。还有更有可能是你参比液的吸光度高吧。好久没做这个了，我也不是很肯定。这个就不太清楚了，可能是仪器的问题了，你可以看看仪器的说明书，看看有什么需要改进的。

这一规律称吸光度的加和性。据此可以进行多组分同时测定及某些化学反应平衡常数的测定。在吸光度测定中。为抵消吸收池对入射光的吸收、反射以及溶剂、试剂等对入射光的吸收、散射等因素，可选用双光束分光光度计，并选光学性质相同、厚度相等的吸收池分别盛待测溶液和参比溶液。

这个极有可能，可能原因，供你参考：确认是否进行 零点校准，可选择蒸馏水或者 你所使用的蒽酮溶液；然后校准100%就可以了，正常情况下，吸光度值应该是正值。

有可能是你的基线没有校正吧。还有更有可能是你参比液的吸光度高吧。 好久没做这个了，我也不是很肯定。 这个就不太清楚了，可能是仪器的问题了，你可以看看仪器的说明书，看看有什么需要改进的。

为什么吸光度测菌体浓度都是负数 菌体浓度的测定（纤维制品的抗菌性试验方法为例）菌种：大肠杆菌（EscherichiacoliATCC8099）试剂与仪器 蛋白胨 牛肉膏 氯化钠 Cary100紫外——可见光分光光度计 培养基 营养细菌培养基NB。蛋白胨5g，牛肉膏粉3g，蒸馏水1000mL，pH8±0.2。

分光光度计测出负值是什么原因,我的空白对照组是1.5ml蒸馏水加1.5mlTB...

1、仪器 分光光度计。 试剂 所用水为去离子水或同等纯度蒸馏水。（1）香草醛、甲醇、浓盐酸均为分析纯级。（2）提纯的原花色素或儿茶素。（3）4%香草醛甲醇液。（4）标准使用液：将提纯的原花色素溶于蒸馏水，制成1mg/mL储备液，将储备液稀至浓度为1×10-2mg/mL至1mg/mL的标准使用液。

2、在测定管中加饱和醋酸钠3ml，Enrlich试剂取5ml加入空白管中。（6）充分混合后，5min内，用721型分光光度计，在560nm处，用蒸馏水调零，读取T管和B管的吸光度值（AT，AB）和酚红标准应用液的吸光度值（AS）。

3、仪器 分光光度计。试剂 无酚纯水（本法所用纯水不得含酚及游离余氯）于水中加入NaOH至pH值为12以上，进行蒸馏。在碱性溶液中，酚形成酚钠不被蒸出。硫酸。氯仿。硫酸铜溶液（100g/L）称取10g硫酸铜（CuSO4·5H2O）溶于100mL水中。氢氧化铵-氯化铵缓冲溶液（pH=8）称取20gNH4Cl溶于100mLNH4OH中。

4、仪器 1．500mL全玻璃蒸馏器 。2．50mL具塞比色管。3．分光光度计。4．pH计。试剂 配制试剂用水均应为无氨水。1．无氨水：可用一般纯水通过强酸性阳离子交换树脂或加硫酸和高锰酸钾后，重蒸馏得到。2．1mol/L氢氧化钠溶液。3．吸收液：①硼酸溶液：称取20g硼酸溶于水中，稀释至1L。

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