包含紫外分光光度计测浓度的词条

本篇文章给大家分享紫外分光光度计测浓度，以及对应的知识点，希望对各位有所帮助。

简述信息一览：

• 1、岛津UV-260紫外可见分光光度计测试未知溶液浓度的方法
• 2、怎么用可见紫外分光光度计测定样品?
• 3、DNA或RNA样品不纯,用紫外分光光度计测定其浓度和纯度的准确性会受到影响...

岛津UV-260紫外可见分光光度计测试未知溶液浓度的方法

1、分光光度计就是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器。 而分光光度法则是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度，对该物质进行定性和定量分析。

2、第一步，知道你所需要测量物质的特征吸收波长是多少？这个可以在国家标准、行业标准或其他相关标准或方法。例如测量总氮的话，就需要220和275nm这2个波长，所以必须买紫外的光度计，并且最好带双波长测定功能，例如测总磷是6***nm，只需买台可见光度计就可以了。

3、分光光度计使用方法：（1）仪器预热。打开样品室盖（光门自动关闭）。开启电源，指示灯亮，仪器预热20 min。选择开关置于“T”旋钮，使数字显示为“00.0”。（2）旋动波长手轮，把所需波长对准刻度线。（3）将装有溶液的比色皿放置比色架中，令参比溶液置于光路。

4、石英比色皿；UV-240紫外分光光度计 操作步骤 UV-240紫外分光光度计开机预热10min. 用重蒸水洗涤比色皿，吸水纸吸干，加入TE缓冲液后，放入样品室的S池架上，关上盖板。 设定狭缝后校零。

5、核酸的定量 核酸的定量是分光光度计使用频率最高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸，单链、双链DNA，以及RNA。核酸的最高吸收峰的吸收波长260 nm。每种核酸的分子构成不一，因此其换算系数不同。定量不同类型的核酸，事先要选择对应的系数。

怎么用可见紫外分光光度计测定样品?

在实际操作中，紫外-可见分光光度法可以通过以下步骤进行定性和定量分析：选择合适的试剂和样品，制备标准溶液和样品溶液。在紫外-可见光谱仪上扫描样品溶液，得到光谱图。根据光谱图选择合适的波长，并测量样品溶液在该波长下的吸光度。根据朗伯-比尔定律计算出样品溶液的浓度。

τ=I/Io log I/Io=KCL A= KCL 从以上公式可以看出，当入射光、吸收系数和溶液的光径长度不变时．透过 的光是根据溶液的浓度而变化的，752紫外可见分光光度计的基本原理是根 据上述物理光学现象而设计的。

微波消解样品，通常宜用小功率分多步的程序升温升压的模式进行消解。理想的微波消解程序是尽量在最低温度下达到迅速分解样品基体中主要组分的目的。了解样品基体中的各组分，对于确定分解的最有效温度是必要的。了解消解特性和样品组分与不同试剂间的互相作用，可使分析工作者更容易控制样品的消解过程。

在选择紫外分光光度计的波长时，尽量选择纯净试样的最大吸收波长，避免同时被杂质吸收。 对于一些不易去除的杂质，可以通过对比实验的方法，建立含杂质和不含杂质两种情况下的A260/A280比值，以此来计算核酸的含量。

开机自检预热，主要设置狭缝，自动样品架控制，数据存储调用打印，测试光度、定量、光谱扫描、动力学测量、蛋白质测量。

DNA或RNA样品不纯,用紫外分光光度计测定其浓度和纯度的准确性会受到影响...

分光光度计***用一个可以产生多个波长的光源，通过系列分光装置，从而产生特定波长的光源，光源透过测试的样品后，部分光源被吸收，计算样品的吸光值，从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。

DNA样品的A260 吸光度值是否0.1。（请注意，这个值跟仪器无关，核酸的吸光度必需大于0.1，其值才有效和可靠，因为样品中的杂质和颗粒这些不纯物的干扰通常会对光有一定吸收，其值0.1）。

这是测核酸浓度和纯度用的。用紫外分光光度计测量样品时，不同成分的样品会有不同的吸光度。260纳米（nm）是核酸的最高吸收峰的吸收波长，280nm则是蛋白和酚类的。一般用A260/A280来检验DNA和RNA的纯度，纯DNA的这个比值约为8，纯RNA约为0.。

取1μDNA，用ddH2O水稀释到1ml，以1ml ddH2O为对照，紫外分光光度计测定OD260，OD280，OD260/OD280（都在 8左右之间，说明 DNA样品纯度较高），concentration。另，基因组DNA1％的琼脂糖凝胶电泳检测均呈现完整清晰条带没有拖尾，说明 DNA 样品的完整性好，也可通过DNA marker 推算出DNA浓度。

两种方法各有优劣。电泳法更直观，如果你有DNA Maker，并且知道Maker的浓度，就可以使用一维条带分析软件如Quantity One分析样品中DNA的含量，而且可以很直观地了解目的DNA的纯度、大小等特性。但是，由于电泳中染色特异性很强，对DNA、RNA之外的小分子污染情况无法检测。

常规的鉴定包括： 凝胶电泳鉴定DNA或RNA大小是否正确，样品是否有降解等；需要的试剂包括琼脂糖，EB或其他核酸染料，DNA/RNA Marker。当然还需要配套的仪器。 紫外分光光度计检测DNA或RNA的浓度和纯度；这个不需要特别的试剂，但需要紫外分光光度计，一般检测OD260与OD280的吸光值。

关于紫外分光光度计测浓度，以及的相关信息分享结束，感谢你的耐心阅读，希望对你有所帮助。