接下来为大家讲解分光光度计标准曲线,以及分光光度计标准曲线计算公式涉及的相关信息,愿对你有所帮助。
测定:按线性范围的要求配制5-8个浓度不等的标准溶液(最好成等差数列),同时配制试样溶液。测定它们的吸光度值,用Excel或Origin进行标准溶液浓度C与A的线性回归处理,得回归方程。将试样的A代入方程,可算得浓度。后面的处理你知道的。
分光光度法的核心原理,是溶液颜色与光线的吸收存在直接关联。通过绘制光吸收曲线,科学家能够建立起标准曲线,以此进行精确的定量分析。其中,工作曲线法和对比法是常用的定量分析方法,前者通过绘制不同浓度溶液的吸收度与浓度的关系,后者则通过比较未知溶液的吸光度与已知标准溶液的差异来得出结果。
测量的范围不同:(1)紫外分光光度计量程为200nm~600nm间,其中包括部分可见光。(2)可见分光光度计量程为320nm-1100nm,能满足不同物质的测试。所用的灯不同:(1)紫外分光光度计通常用氢灯或氘灯。(2)可见分光光度计通常***用钨灯或卤钨灯。
简单,取一个标准样品(就是自己配一个试样,多配点),然后取这个试样反复测试,最少11次,相当于自己假设测了11个样品一样,每次测试的时候要用同一个比色皿。测11次是因为11次好算。补充重现性看的是仪器的精确度。重现性实验就是按我说的做就行了。
1、标准曲线的绘制 用100ml的容量瓶配制浓度分别为50mg/L、100mg/L、150mg/L、200mg/、250mg/L的甲基橙溶液备用。
2、处理化学分光光度计实验数据的步骤如下: **数据输入:** 将实验测得的吸光度数据输入Excel的一列中,通常第一列为浓度(或波长),第二列为吸光度。 **绘制标准曲线:** 如果你的实验是为了构建标准曲线,可以将浓度与吸光度的数据绘制成散点图。
3、机器开关在机器的右侧,按一下就会打开,有个小的屏幕,可以按数字键来操作选项,测吸光值操作。按数字键1,进入选项,有当前参数、吸光度等。点击键盘上的GOTO键去设置,一般设置为600,输入直接按数字键就可以。输入之后按ENTER这个键,这个是确认键。
4、以某一特定波长条件下由分光光度计分别测出一系列不同溶度标准溶液然的吸光度值,以吸光光度值为纵坐标,相应的溶液浓度为横坐标,在坐标纸上可作出一条吸光度与浓度成正比通过原点的直线,称作标准曲线。~~~绘制标准曲线的实用意义就是只要测得其吸光度值即可在标准曲线上查出相应的浓度值。
5、紫外分光光度法测定苯酚的含量一般可按以下步骤进行:根据实验需要,制备不同浓度的苯酚标准溶液。(如下图所示)使用紫外分光光度计,在适当的波长下(如270 nm)测定各标准溶液的吸光度,并绘制出吸光度与浓度的标准曲线。(如下图所示)取待测样品,将其在相应的波长下测定吸光度。
具体方法是:用标准样品配制成不同浓度的标准系列,在与待测组分相同的色谱条件下,等体积准确进样,测量各峰的峰面积或峰高,用峰面积或峰高对样品浓度绘制标准曲线,此标准曲线应是通过原点的直线。若标准曲线不通过原点,则说明存在系统误差。标准曲线的斜率即为绝对校正因子。
**制备标准溶液:** 首先,准备一系列包含已知浓度的标准溶液,这些溶液覆盖了待测成分的浓度范围。这些标准溶液可以用于构建标准曲线。 **测定标准溶液的吸光度:** 使用分光光度计或其他适当的仪器,测定每个标准溶液的吸光度。这些测定通常在特定波长下进行,与待测成分的吸收峰有关。
在定量分析时,首先需要测定溶液对不同波长光的吸收情况(吸收光谱),从中确定最大吸收波长 ,然后以此波长 的光为光源,测定一系列已知浓度c溶液的吸光度A,作出A~c工作曲线。在分析未知溶液时,根据测量的吸光度A,查工作曲线即可确定出相应的浓度。这便是分光光度法测量浓度的基本原理。
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