核酸浓度分光光度计

简述信息一览：

• 1、分光光度计的a260与a230代表什么?
• 2、分光光度计常见的用途
• 3、如何用分光光度计测量核酸的浓度

分光光度计的a260与a230代表什么?

1、A260：A230是分光光度计测量RNA溶液的浓度出现的数值，表示样品的纯度。A260表示核酸的最高吸收峰的吸收波长260nm，A230表示样品中存在一些污染物，如碳水化合物，多肽，苯酚等。纯净的样品，比值大于8（DNA）或者0（RNA）。如果比值低于8 或者0，表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。

2、A260：A230是分光光度计测量RNA溶液的浓度出现的数值，表示样品的纯度。260nm是核酸分子吸收峰的波长，而230nm的波长处如果出现吸收，则最有可能由苯酚等化学基团引起。A260nm：是核酸最高吸收峰的吸收波长，最佳测量值的范围为0.1至0。

3、A230产生负值主要是由于在很低 DNA 浓度的溶液中的一些其他成分的干扰所导致的。在下一个测定中，需要降低样品的稀释度，A230的负值会被校正。A260/A280比值可进行核酸样品纯度评估：纯DNA的A260/A280比值为8，纯 RNA的A260/A280比值为0。

4、A260/A280的比值，用于评估样品的纯度，因为蛋白的吸收峰是280nm。纯净的样品，比值大于8（DNA）或者0（RNA）。如果比值低于8 或者0，表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。A230表示样品中存在一些污染物，如碳水化合物，多肽，苯酚等，较纯净的核酸A260/A230的比值大于0。

分光光度计常见的用途

1、原子吸收分光光度计现已广泛用于各个分析领域，主要有四个方面：理论研究、元素分析、有机物分析、金属化学形态分析。 理论研究中的应用：原子吸收可作为物理和物理化学的一种实验手段，对物质的一些基本性能进行测定和研究。

2、用来测量待测物质对可见光（400～760nm）的吸光度并进行定量分析的仪器，称为可见分光光度计。可在600nm测定细菌细胞密度。紫外可见光谱仪用来测量待测物质对可见光或紫外光（200～760nm）的吸光度并进行定量分析的仪器。可以测定核酸和蛋白的浓度，涡街流量计也可以测定细菌细胞密度。

3、分光光度计在科学研究中有着广泛的应用，其中最常见的用途之一是核酸的定量分析。它能精确测量溶解在缓冲液中的寡核苷酸、单链和双链DNA，以及RNA。核酸在260纳米的波长处有最高吸收值，不同类型的核酸分子结构各异，需要相应的换算系数进行定量。

4、检定物质 与标准物及标准图谱对照 比较最大吸收波长吸收系数的一致性4 纯度检验 推测化合物的分子结构络合物组成及稳定常数的测定 分光光度分析就是根据物质的吸 收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。

5、紫外分光光度计用于检定物质，通过分析物质的吸收光谱来识别和量化样品中的成分。 在分析过程中，将待测物质的吸收光谱与标准物或标准图谱进行对照，以确定物质的种类和浓度。 通过比较最大吸收波长的吸收系数，可以验证实验结果的一致性，确保数据的准确性。

如何用分光光度计测量核酸的浓度

1、只有一台分光光度计，那应该题目是说没有酸溶性核苷酸和低聚多核苷酸吧，这些都是要用钼酸铵-过氯酸沉淀剂，沉淀除去大分子核酸，因为用分光光度计是不允许有沉淀的。将样品配制成 一定浓度的溶液（20~50μg/mL），选 取比色杯厚度为1CM，在紫外分光光度计上直接测定260NM和280NM的OD值。

2、分光光度计先用水在260nm和280nm两个波长下校零。2） 取质粒DNA样品2μl，用水稀释100倍，转入分光光度计的石英比色杯中。3） 在260nm和280nm分别读出样品光密度值。如果样品浓度单位为μg/μl，则样品DNA浓度为OD 值的10倍，即如 ODSUB260/SUB=0.1，则样品浓度即为1μg/μl。

3、A260nm是核酸最高吸收峰的吸收波长，最佳测量值的范围为0.1至0。如果不在此范围，稀释或浓缩样品，使之在此范围内；如果吸光度小于0.05，检查是否存 在操作因素（如移液不准确，样品内有悬浮物等）影响。DNA样品的A260 吸光度值是否0.1。

4、首先将试样在高速离心后，去除其中的杂质，保留核酸。 在选择紫外分光光度计的波长时，尽量选择纯净试样的最大吸收波长，避免同时被杂质吸收。 对于一些不易去除的杂质，可以通过对比实验的方法，建立含杂质和不含杂质两种情况下的A260/A280比值，以此来计算核酸的含量。

5、一般用微量分光光度计比较快速简便，DNA浓度会直接在软件上显示，A260 / A280的比值用于评估样品的纯度， 纯净的样品比值大于8，低于0。较纯净的核酸A260/A230的比值大于0。

关于核酸浓度分光光度计，以及核酸浓度测定仪原理的相关信息分享结束，感谢你的耐心阅读，希望对你有所帮助。