光度计测量浓度

简述信息一览：

• 1、用分光光度计测dna浓度的数值代表什么意义
• 2、邻二氮菲分光光度法测定铁的浓度
• 3、分光光度计测葡萄糖浓度
• 4、分光光度计测样品含量,标准曲线得出来了,样品的吸光度和浓度怎么算
• 5、...光光度计上,利用550nm波长处来直接测定样品的浓度和标准量,为什么...

用分光光度计测dna浓度的数值代表什么意义

nanodrop是基于吸光值来计算核酸浓度。nanodropone是一种超微量分光光度计，在进行测dna时，出现浓度相差大的情况，是因为nanodrop是基于吸光值来计算核酸浓度，当核酸里面有污染时，浓度就会相差很大。

这个情况确实时有发生，浓度太低的时候就可能有负值，厂家没有直接解释，一般就是让你开机后等半小时以上，机器热平衡后再测，样品也最好平衡到室温再测，温度的变化也会有影响。或者是检查空白对照是否有问题，比如换换比色皿什么的。

现在利用紫外分光光度仪测出来的DNA和RNA的浓度应该是比较准的了，利用琼脂糖凝胶电泳检测后也可以对dna和RNA的浓度进行定量分析，但是比较费时间，有条件的实验室都开始用紫外分光光度仪测DNA和RNA的浓度了。

在260nm下测定其吸光值。注意，这是紫外。计算：DNA的质量浓度（mg/L）= 50×A260nm 原理：核酸分子中的嘌呤碱和嘧啶碱由于碱基共轭双键的作用，具有强烈的紫外吸收，最大吸收值在260nm处。不能再具体了吧，虽然很简单，但已经够用啦。

邻二氮菲分光光度法测定铁的浓度

1、邻二氮菲（1，10-Phenanthroline）分光光度法是一种常用于测定铁离子（Fe2+和Fe3+）浓度的分析方法。这种方法基于邻二氮菲与铁离子形成的络合物的形成常数，以及该络合物的吸光度与铁离子浓度之间的关系。

2、使用更精确的仪器和方法：如果常规的分光光度法无法满足高浓度铁样品的测定要求，可以考虑使用更精确的仪器和方法进行测定。例如，可以使用原子吸收光谱法、电感耦合等离子体发射光谱法等高精度的方法进行测定。

3、显色剂用量不足：邻二氮菲作为显色剂，与铁离子发生显色反应。如果显色剂用量不足，会导致反应不完全，使得铁离子浓度测量偏低。因此，应确保显色剂用量充足，使铁离子与显色剂充分反应。测量波长选择不准确：在分光光度法中，测量波长的选择对实验结果具有重要影响。

4、因为含铁的溶液中其它的物质也有吸光度，会影响铁的吸光度的测定，所以要排除这部分溶液的影响，用到参比溶液，就是含铁溶液中的没有待测物的溶液。

5、邻菲啰啉分光光度法测定铁含量的原理，在pH=2~9的溶液中，邻二氮菲与2价亚铁离子（Fe2+）发生显色反应，该反应的选择性很高，而且生成的橙红色络合物非常稳定，lgK稳=23（20℃），其溶液在510nm（可见光）有最大吸收峰，利用此显色反应，可以用可见光分光光度法测定微量铁。

6、邻二氮菲分光光度法测定铁实验是目前普遍***用的一种测定方法。

分光光度计测葡萄糖浓度

先用标准葡萄糖试剂（可在试剂门市部买到），用蒸馏水配成已知的标准溶液（一般配0.5%、1%、3%、5%、7%五个浓度的溶液即可），分别在分光光度计上（最好465微米处）测定光密度（吸光度）。

葡萄糖（也有用白砂糖的）的旋光特性和浓度成线性关系。beta = K * L * p （+ alpha）对于不均匀液体，有 beta= 积分号 K * p（L）dL L是光线通过溶液的长度。p是溶液浓度，一般认为是均匀的。K是旋光系数，要通过已知数据来反算的。

大致是先做一个不同浓度梯度的葡萄糖溶液的透光度数据表。

分光光度计测样品含量,标准曲线得出来了,样品的吸光度和浓度怎么算

先把标准品的浓度和每个标准品的吸光度用Excel生成标准曲线，同时得到公式。测量每个样本的吸光度。把吸光度代入公式，计算出对应的浓度.如果样本有稀释，还要乘以稀释倍数。DNA及RNA含量测定方法：取5ulDNA样品或4ulRNA样品加水到lml。用lml水做空白。把样品杯放在分光光度计比色槽上。

** 将待测样品的吸光度与标准曲线上的吸光度相对应的浓度进行比较，从而计算出待测样品中待测成分的浓度。标准曲线法的关键在于建立一个准确、可靠的标准曲线，并通过测定待测样品的吸光度，利用标准曲线进行浓度的计算。这种方法通常用于分析中，如分子吸收光谱、原子吸收光谱等领域。

你说的这个很笼统，用分光光度计举个例子吧。首先用已知的一系列成浓度梯度的已知溶液，用光度计在最大吸收波长下测出吸光度，做出标准曲线，这样，标准曲线就是 该物质的 浓度值和吸光度的关系了。

计算样品的吸光度。 分析结果：根据样品吸收的光强计算出吸光度后，可以使用相关计算公式和标准曲线将数据转换成目标化合物的浓度。最后，对吸光度测量结果进行分析，并得出结论。总之，分光光度计是一种用于测量化合物浓度的非常有用的化学工具，通过这些步骤，可以准确测量样品***定的化学物质的浓度。

测定待测样品：将待测样品与适当的显色剂反应，生成有色物质。然后，使用分光光度计测定待测样品的吸光度值。查找吸光度值：在标准曲线上查找与待测样品吸光度值相对应的浓度。这个浓度即为待测样品中目标组分的浓度。需要注意的是，标准曲线和溶液浓度的选择对吸光度值的准确性具有重要影响。

...光光度计上,利用550nm波长处来直接测定样品的浓度和标准量,为什么...

另外，即使在550nm波长处进行测量，也不能保证样品的吸光度在该波长处完全符合朗伯-比尔定律。不同样品对光的吸收有其独特的特征，可能存在偏离朗伯-比尔定律的情况。因此，直接测定样品的浓度可能会产生误差。综上所述，为了准确测定样品的浓度和标准量，建议使用标准品进行校准和参照。

放置5h后，在分光光度计上，于波长550nm处测量吸光度。绘制校准曲线。分析步骤 称取0.1～0.2g（精确至0.0001g）试样置于铂坩埚中，加1mL（1+1）H2SO4，摇匀，再加10mLHF，轻轻摇动溶液，放置10min。移至电炉上低温加热，待试样分解完全后，蒸发溶液至冒三氧化硫白烟。

在分光光度计上，用lcm比色皿，以水为参比溶液，用不同的波长，从430～570nm，每隔20nm测定一次吸光度，在最大吸收波长处附近多测定几点。然后以波长为横坐标，吸光度为纵坐标绘制出吸收曲线，从吸收曲线上确定进行测定铁的适宜波长（即最大吸收波长）。

以试剂溶液作参比，用1cm比色皿，在λ=440~560nm处每间隔10nm测定00 Mg2+标准液的吸光度，从吸收曲线上找到 。

关于光度计测量浓度，以及光度计是测什么的的相关信息分享结束，感谢你的耐心阅读，希望对你有所帮助。