文章阐述了关于光度计比色杯,以及光度比色法的信息,欢迎批评指正。
①1mL(等量)氢氧化钠溶液(试剂量和试剂名缺一不给分) 1mL(等量)盐酸溶液(试剂量和试剂名缺一不给分)。
常用于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。 核酸的定量是超微量分光光度计使用频率最高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸,单链、双链DNA,以及RNA。核酸的最高吸收峰的吸收波长260 nm。每种核酸的分子构成不一,因此其换算系数不同。定量不同类型的核酸,事先要选择对应的系数。
分光光度计、电子天平、离心机、pH测定仪,恒温水箱、匀浆器、剪子、镊子、冰块、50ml比色管若干、移液管若干,500ml容量瓶,烧杯。[实验步骤]酶提取液的制备(见实验蛋白酶活力的测定)淀粉酶活力的测定 取50ml刻度比色管二只,标明为对照管,测定管。
用台盼兰染细胞,死细胞着色,活细胞不着色,从而可以区分死细胞与活细胞。利用细胞内某些酶与特定的试剂发生显色反应,也可测定细胞相对数和相对活力。
1、市面上卖的比色皿造型不是完全一样的,有的没有石英标识。可在紫外波长下检测空比色皿的吸光度,玻璃的吸光度要比石英的大。将光度计的波长设定为250nm,样品室内不放任何物品,调零,然后将比色皿置于样品道一侧,吸光值小于0.07Abs的是石英材料,反之是玻璃材料。
2、对于一般的非光学专业人员,用眼睛是不能分开的。但其硬度差别很大很大。石英比色皿比玻璃比色皿硬度大(绝对值)几十倍,如果把两个对磨,石英比色皿将很少被磨损,而玻璃比色皿磨损非常大。由于石英比色皿的透光范围从0.12——5微米,广泛的谱段范围内没有任何吸收峰。
3、对于一般的非光学专业人员,用眼睛是不能分开的两种比色皿的。但是两者硬度差别很大很大。石英比色皿比玻璃比色皿硬度大(绝对值)几十倍,如果把两个对磨,石英比色皿将很少被磨损,而玻璃比色皿磨损非常大。由于石英比色皿的透光范围从0.12——5微米,广泛的谱段范围内没有任何吸收峰。
4、使用紫外可见分光光度计来鉴别玻璃、石英比色皿和配对比色皿。现行国家检定规程规定石英比色皿在250nm下吸光度应小于0.07abs,若吸光度大于0.07abs 则为玻璃比色皿。比色皿内不放置任何样品,以空气为介质,波长设置250nm,调零。
1、分光光度计的使用方法是:预热仪器。为使测定稳定,将电源开关打开,使仪器预热20min,为了防止光电管疲劳,不要连续光照。预热仪器时和在不测定时应将比色皿暗箱盖打开,使光路切断。选定波长。根据实验要求,转动波长调节器,使指针指示所需要的单色光波长。固定灵敏度档。
2、很多情况都有可能造成负值。例如:测定管加入试剂错误;分光光度计不稳定,数据漂移;比色时未倒够比色杯的2/3;比色杯放置面错,毛面朝光;试管、移液管不洁净;移液管混用;所用试剂过期;加热温度过高等等,这些都有可能导致出现负值。
3、盖上暗箱盖,调节“100”调节器,使空白管的t=100,指针稳定后逐步拉出样品滑竿,分别读出测定管的光密度值,并记录。比色完毕,关上电源,取出比色皿洗净,样品室用软布或软纸擦净。
4、重复进行打开样品室盖,调0,盖上样品室盖,调透射比为100%的操作至仪器稳定。盖上样品室盖,推动试样架拉手,使样品溶液池置于光路上,读出吸光度值。读数后应立即打开样品室盖。测量完毕,取出比色皿,洗净后倒置于滤纸上晾干。各旋钮置于原来位置,电源开关置于“关”,拔下电源插头。
5、实验中偶尔会出现菌液的OD值出现负值,原因是***用了显色的培养基,即细菌培养一段时间后,与培养基反应,发生变色反应。另外,需要注意的是,测试的样品不能离心,保持细菌悬浮状态。 分光光度计的重要配件 —— 比色杯 比色杯按照材质大致分为石英杯、玻璃杯以及塑料杯。
6、楼主验证了相似相容的原理啊 实验还是用石英的比色皿稳当些 看情况是溶解的有机物使得池子的滑动受阻了,胆大的话就自己拆下来清理一下把,上点润滑油,拆之前多拍几张细节的照片,免得到时候安不上。
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