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光度计比色杯

文章阐述了关于光度计比色杯，以及光度比色法的信息，欢迎批评指正。

简述信息一览：

①1mL（等量）氢氧化钠溶液（试剂量和试剂名缺一不给分） 1mL（等量）盐酸溶液（试剂量和试剂名缺一不给分）。

常用于核酸，蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。核酸的定量是超微量分光光度计使用频率最高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸，单链、双链DNA，以及RNA。核酸的最高吸收峰的吸收波长260 nm。每种核酸的分子构成不一，因此其换算系数不同。定量不同类型的核酸，事先要选择对应的系数。

（图片来源网络，侵删）

分光光度计、电子天平、离心机、pH测定仪，恒温水箱、匀浆器、剪子、镊子、冰块、50ml比色管若干、移液管若干，500ml容量瓶，烧杯。[实验步骤]酶提取液的制备（见实验蛋白酶活力的测定）淀粉酶活力的测定取50ml刻度比色管二只，标明为对照管，测定管。

用台盼兰染细胞，死细胞着色，活细胞不着色，从而可以区分死细胞与活细胞。利用细胞内某些酶与特定的试剂发生显色反应，也可测定细胞相对数和相对活力。

1、市面上卖的比色皿造型不是完全一样的，有的没有石英标识。可在紫外波长下检测空比色皿的吸光度，玻璃的吸光度要比石英的大。将光度计的波长设定为250nm，样品室内不放任何物品，调零，然后将比色皿置于样品道一侧，吸光值小于0.07Abs的是石英材料，反之是玻璃材料。

（图片来源网络，侵删）

2、对于一般的非光学专业人员，用眼睛是不能分开的。但其硬度差别很大很大。石英比色皿比玻璃比色皿硬度大（绝对值）几十倍，如果把两个对磨，石英比色皿将很少被磨损，而玻璃比色皿磨损非常大。由于石英比色皿的透光范围从0.12——5微米，广泛的谱段范围内没有任何吸收峰。

3、对于一般的非光学专业人员，用眼睛是不能分开的两种比色皿的。但是两者硬度差别很大很大。石英比色皿比玻璃比色皿硬度大（绝对值）几十倍，如果把两个对磨，石英比色皿将很少被磨损，而玻璃比色皿磨损非常大。由于石英比色皿的透光范围从0.12——5微米，广泛的谱段范围内没有任何吸收峰。

4、使用紫外可见分光光度计来鉴别玻璃、石英比色皿和配对比色皿。现行国家检定规程规定石英比色皿在250nm下吸光度应小于0.07abs，若吸光度大于0.07abs 则为玻璃比色皿。比色皿内不放置任何样品，以空气为介质，波长设置250nm，调零。

1、分光光度计的使用方法是：预热仪器。为使测定稳定，将电源开关打开，使仪器预热20min，为了防止光电管疲劳，不要连续光照。预热仪器时和在不测定时应将比色皿暗箱盖打开，使光路切断。选定波长。根据实验要求，转动波长调节器，使指针指示所需要的单色光波长。固定灵敏度档。

2、很多情况都有可能造成负值。例如：测定管加入试剂错误；分光光度计不稳定，数据漂移；比色时未倒够比色杯的2/3；比色杯放置面错，毛面朝光；试管、移液管不洁净；移液管混用；所用试剂过期；加热温度过高等等，这些都有可能导致出现负值。

3、盖上暗箱盖，调节“100”调节器，使空白管的t=100，指针稳定后逐步拉出样品滑竿，分别读出测定管的光密度值，并记录。比色完毕，关上电源，取出比色皿洗净，样品室用软布或软纸擦净。

4、重复进行打开样品室盖，调0，盖上样品室盖，调透射比为100%的操作至仪器稳定。盖上样品室盖，推动试样架拉手，使样品溶液池置于光路上，读出吸光度值。读数后应立即打开样品室盖。测量完毕，取出比色皿，洗净后倒置于滤纸上晾干。各旋钮置于原来位置，电源开关置于“关”，拔下电源插头。

5、实验中偶尔会出现菌液的OD值出现负值，原因是***用了显色的培养基，即细菌培养一段时间后，与培养基反应，发生变色反应。另外，需要注意的是，测试的样品不能离心，保持细菌悬浮状态。分光光度计的重要配件 —— 比色杯比色杯按照材质大致分为石英杯、玻璃杯以及塑料杯。

6、楼主验证了相似相容的原理啊实验还是用石英的比色皿稳当些看情况是溶解的有机物使得池子的滑动受阻了，胆大的话就自己拆下来清理一下把，上点润滑油，拆之前多拍几张细节的照片，免得到时候安不上。

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