分光光度计测量浓度

今天给大家分享分光光度计测浓度优点，其中也会对分光光度计测量浓度的内容是什么进行解释。

简述信息一览：

• 1、紫外可见分光光度计法测核酸含量有何优缺点
• 2、为什么可以采用分光光度法检查颜色?目的是什么?
• 3、如何用分光光度计测量核酸的浓度
• 4、紫外可见分光光度法特点和适用范围
• 5、分光光度法和比色法有何异同
• 6、分光光度计法和目测法测曲药液化型淀粉酶活力的优缺点

紫外可见分光光度计法测核酸含量有何优缺点

1、在使用紫外分光光度计法测定核酸含量时，如果试样中含有核苷酸类杂质，可能会影响测定结果。为了减小干扰，可以***取如下措施： 首先将试样在高速离心后，去除其中的杂质，保留核酸。 在选择紫外分光光度计的波长时，尽量选择纯净试样的最大吸收波长，避免同时被杂质吸收。

2、核酸的定量 核酸的定量是分光光度计使用频率最高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸，单链、双链DNA，以及RNA。核酸的最高吸收峰的吸收波长260 nm。每种核酸的分子构成不一，因此其换算系数不同。定量不同类型的核酸，事先要选择对应的系数。

3、酮，很可能是一个饱和化合物。定量分析 用于测定物质的浓度或含量，测定步骤与可见光分光光度计相同 。异构体的判断 例如：乙酰乙酸乙酯存在酮-烯醇互变异构体。酮式没有共轭双键，在204nm处有弱吸收；烯醇式有共轭双键，在245nm处有强吸收。故可根据它们的紫外吸收光谱可判断其存在与否。

为什么可以***用分光光度法检查颜色?目的是什么?

1、维生素C注射液中vc含量为微量，颜色看不出来，分光光度法实验的时候，选择的显色剂可以和vc形成一些有较深的深色团的络合物，它的颜色根据你选择的显色剂，往往有不同的效果。

2、Vc的水溶液在高于或低于PH5~6时，受空气、光线和温度的影响，分子中的内酯环可发生水解，并进一步发生脱羧反应生成糠醛聚合成色（此时的共扼双键更多），使溶液颜色加深，此时测得的吸光度变大。所以吸光度大说明试剂被水解得更多，制剂更不稳定。

3、分光光度法测量：是物质分子对不同波长处的辐射吸收程度的测量。波长的选取是尽可能大，只有这样待测液组分对光的吸收才更充分，测定结果误差才最小。物质与光作用，具有选择吸收的特性。有色物质的颜色是该物质与光作用产生的。即有色溶液所呈现的颜色是由于溶液中的物质对光的选择性吸收所致。

4、为保持试剂和仪器的稳定性监控，试剂空白需要以蒸馏水为空白，记录真实数据。它具有灵敏度高、操作简便、快速等优点，是生物化学实验中最常用的实验方法。许多物质的测定都***用分光光度法。在分光光度计中，将不同波长的光连续地照射到一定浓度的样品溶液时，便可得到与不同波长相对应的吸收强度。

5、抗坏血酸被铜氧化成脱氢抗坏血酸和二酮古洛糖酸。分光光度计测vc颜色原理是抗坏血酸被铜氧化成脱氢抗坏血酸和二酮古洛糖酸。在乙酸溶液中， 抗坏血酸与固蓝盐B反应生成***的草酰肼-2-羟基丁酰内酯衍生物。

6、分光光度法是光谱法的重要组成部分，是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内的吸光度或发光强度，对该物质进行定性和定量分析的方法。常用的技术包括紫外-可见分光光度法、红外分光光度法、荧光分光光度法和原子吸收分光光度法等。

如何用分光光度计测量核酸的浓度

首先，分光光度计测量的样品必须是均一的，摇匀后再测量结果会准确些.它是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器. 核酸的定量是分光光度计使用频率最高的功能.可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸，单链、双链DNA，以及RNA.核酸的最高吸收峰的吸收波。

取1μDNA，用ddH2O水稀释到1ml，以1ml ddH2O为对照，紫外分光光度计测定OD260，OD280，OD260/OD280（都在 8左右之间，说明 DNA样品纯度较高），concentration。另，基因组DNA1％的琼脂糖凝胶电泳检测均呈现完整清晰条带没有拖尾，说明 DNA 样品的完整性好，也可通过DNA marker 推算出DNA浓度。

【答案】：分光光度法不但能确定核酸浓度，还可通过测定在260nm和280nm的紫外光吸收值的比值（A260/A280）估计核酸的纯度。纯净的DNA制品的A260/A280为8。DNA样品A260/A280为8～0时，表明样品纯度已达到要求。

用lml水做空白。把样品杯放在分光光度计比色槽上。每ul中DNA或RNA浓度（ug）将是OD值的10倍，例如稀释后样品在260nm处OD值为0.2，则原DNA或RNA样品浓度为2ug／ul。如果想要检测样品的纯度，那么还要再测一次280nm处OD值，计算二者的比率，若比率接近2，则说明样品中核酸比较纯。

紫外可见分光光度法特点和适用范围

定量的主要误差来源于共存物的谱线重叠而引起的光谱干扰，可运用现代分离技术及计算机辅助技术的应用而得以补偿。

紫外-可见吸收光谱法广泛地用于无极和有机物质的定性和定量测定，灵敏度和选择性较好，可以用于定性和定量分析（计算最大吸收波长，单组份和多组分的定量分析），以及配合物的自称和稳定常数的测定，研究有机化合物的异构体，测定相对分子质量等。希望对你有用。

在水和废水监测中的应用，对于一个水系的监测分析和综合评价，一般包括水相（溶液本身）、固相（悬浮物、底质）、生物相（水生生物）。在水质的常规监测中，紫外可见分光光度法占有较大的比重。由于水和废水的成分复杂多变，待测物的浓度和干扰物的浓度差别很大，在具体分析时必须选择好分析方法。

药物分析：《国家药典》可用紫外可见光分光光度法检测的药品，适用于药品检验、药物分析、制药等行业。生命科学：DNA、蛋白质的浓度。农牧渔：农药残留检测、作物成分检测、兽药检测、饲料检测、化肥检测、土壤成分检测、水产养殖检测等。地质勘探：矿石中金属元素和无机盐的测定。

一）紫外-可见分光光度法 ultravioletvisible absorption spectroscopy 根据被测量物质分子对紫外-可见波段范围（150～800纳米）单色辐射的吸收或反射强度来进行物质的定性、定量或结构分析的一种方法。分光光度测量是关于物质分子对不同波长和特定波长处的辐射吸收程度的测量。

分光光度法和比色法有何异同

血红蛋白浓度的测定是医学检验中的常规项目，可以通过多种方法进行。以下是两种不同的方法来测定受试者的血红蛋白浓度：比色法（Cyanmethemoglobin法）：比色法是一种传统的血红蛋白测定方法。

目视只能给出基本的差异，但是分光光度法能够精确测定数值，虽然原理也是相对强度，但是加上基准物质校准，就会得到绝对的强度值，如果定性，目测即可。如果要求与浓度挂钩，比如利用兰博比尔定律算浓度，那么必须要分光光度法，目测无法给出浓度。

操作容易，测定成分广，灵敏度高。操作容易：分光光度法是比色法的发展，比色法只限于在可见光区，分光光度法则可以扩展到紫外光区和红外光区。测定成分广：分光光度法具有较高的精度，能满足目前环境监测的要求，设备价廉轻便，操作简易。

分光光度计法和目测法测曲药液化型淀粉酶活力的优缺点

a）分光光度计 b）恒温水浴50℃-100℃，精度±0.1℃ c）试管：25mm×200mm d）容量瓶 e）自动吸管 f）秒表 4 待测酶液的制备 液体酶制剂：直接用缓冲溶液配制，使最终浓度控制在65-70u/mL范围内。

方便，灵敏，除了知道含量，还知道组成成分。从吸收光谱中，可以确定最大吸收波长λmax和最小吸收波长λmin。物质的吸收光谱具有与其结构相关的特征性。可以通过特定波长范围内样品的光谱与对照光谱或对照品光谱的比较，或通过确定最大吸收波长，或通过测量两个特定波长处的吸收比值而鉴别物质。

在一定范围内，其颜色深浅与淀粉酶水解产物的浓度成正比，可用麦芽糖（或葡萄糖）浓度表示，用比色法测定淀粉生成的还原糖的量，以单位重量样品在一定时间内生成的麦芽糖的量表示酶活力。

关于分光光度计测浓度优点，以及分光光度计测量浓度的相关信息分享结束，感谢你的耐心阅读，希望对你有所帮助。