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紫外分光光度计含量的计算的简单介绍

xiaofei
光度计
2024-07-17 13:36:39
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今天给大家分享紫外分光光度计含量的计算，其中也会对的内容是什么进行解释。

简述信息一览：

1、紫外光分光光度计用吸光度计较吸附量和吸附率的公式是什么
2、如何利用紫外分光光度计测定叶绿素的含量?
3、蛋白浓度测定的方法具体有哪些?
4、紫外分光光度计计算方法同吸光度、浓度有什么关系?吸光度是计算出来的吗...

紫外光分光光度计用吸光度计较吸附量和吸附率的公式是什么

1、单色光辐射穿过被测物质溶液时，被该物质吸收的量与该物质的浓度和液层的厚度（光路长度）成正比，其关系如下式：A=-log（I/I。）=-lgT=kLc A 为吸收度；I。

2、分光光度计定量的基础是光吸收定律：A=KcL或者A=εcL，及是根据溶液对光的吸收程度来定量的。如果比色皿中存在气泡，气泡会对光有一个折射作用，这同样会导致通过溶液后的光强减弱，吸光度增加，致使测量的浓度变大。

（图片来源网络，侵删）

3、常用紫外分光光度计于403nm和280nm进行测定，然后按下列公式计算：酶量（mg/ml）=OD403×0.42IgG量（mg/ml）=（OD280-OD403×0.4）×0.94×0.62对于过碘酸钠氧化法制备的标记抗体量，按下列公式计算：IgG量（mg/ml）=（OD280-OD403×0.34）×0.62已知酶量和IgG量后，即可计算出标记抗体的摩尔（mol）比值。

如何利用紫外分光光度计测定叶绿素的含量?

1、光密度测定：将叶绿素提取液置于紫外可见分光光度计或分光光度计中，选择适当的波长进行测定。一般可以选择440 nm和663 nm两个波长。分别测量样品溶液在这两个波长下的吸光度。叶绿素浓度计算：根据光密度测定结果，使用比色法或标准曲线法计算出叶绿素的浓度。

2、叶绿素的含量测定方法有多种，其中主要有：原子吸收光谱法：通过测定镁元素的含量，进而间接计算叶绿素的含量。分光光度法：利用分光光度计测定叶绿素提取液在最大吸收波长下的吸光值，即可用朗伯—比尔定律计算出提取液中各色素的含量。

（图片来源网络，侵删）

3、叶绿素含量的测定方法：分光光度法。分光光度法是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度，对该物质进行定性和定量分析的方法。它具有灵敏度高、操作简便、快速等优点，是生物化学实验中最常用的实验方法。许多物质的测定都***用分光光度法。

4、a）数显不稳、无法调“0”点或“100%”点（电路或光电管受潮）。b）反射镜发霉或沾污，影响光效率、杂散光增加。鉴于上述原因，分光光度计的放置地点应远离水池等湿度大的地方、干燥剂应定期更换或烘烤。3）仪器的工作环境。

5、辣椒植株叶绿素含量的测定方法，取材，测定如下：材料、仪器设备及试剂（一）材料：新鲜（或烘干）的植物叶片。（二）仪器设备：分光光度计；电子顶载天平（感量0.01g）；研钵；棕色容量瓶；小漏斗；定量滤纸；吸水纸；擦境纸；滴管。

蛋白浓度测定的方法具体有哪些?

1、蛋白浓度测定的方法：紫外分光光度法紫外光谱吸收法测定蛋白质含量是讲蛋白质溶液直接在紫外分光光度计中测定的方法，不需要任何试剂，操作简单且易回收。蛋白质溶液在280nm附近有强烈的吸收，这是由于蛋白质中酪氨酸、色氨酸残基而引起的，所以光密度受这两种氨基酸含量的支配。

2、测蛋白浓度的方法有：凯氏定氮法、双缩脲法、酚试剂法、紫外吸收法。凯氏定氮法：凯氏定氮法是测定化合物或混合物中总氮量的一种方法。

3、UV法。这种方法是在280nm波长，直接测试蛋白。选择Warburg 公式，光度计可以直接显示出样品的浓度，或者是选择相应的换算方法，将吸光值转换为样品浓度。蛋白质测定过程非常简单，先测试空白液，然后直接测试蛋白质。从而显得结果很不稳定。蛋白质直接定量方法，适合测试较纯净、成分相对单一的蛋白质。

4、紫外分光光度法：此法利用蛋白质在280nm波长处的紫外吸收特性来测定蛋白质含量。蛋白质中的酪氨酸和色氨酸残基会导致强烈的吸收。为了校正核酸等干扰物质的影响，同时测定280nm和260nm的吸光度，并通过计算得出蛋白质含量。