校正吸光度与吸光度

文章阐述了关于校正光度计的吸光度，以及校正吸光度与吸光度的信息，欢迎批评指正。

简述信息一览：

• 1、吸光度范围可以调吗
• 2、关于光度计使用中吸光度的问题!
• 3、紫外可见分光光度计的性能指标调校实验中,如何进行光度准确度校正?
• 4、吸光度不在0.2-0.8范围内,怎样使误差在范围内
• 5、紫外分光光度计吸光度校正需要用到的溶液多少升

吸光度范围可以调吗

进行调整。酶标仪的吸光度测定范围在0至5之间，因此酶标仪吸光度超过1240nm需要进行调整，酶标仪是一种实验室仪器，用于测量微孔板孔内的化学、生物或物理反应、特性和分析物。

我们在进行实验的时候，可以调整标样和待测样的浓度使其吸收正好落在这一范围内。

吸光系数与入射光的波长以及被光通过的物质有关，只要光的波长被固定下来，同一种物质，吸光系数就不变。当一束光通过一个吸光物质（通常为溶液）时，溶质吸收了光能，光的强度减弱。吸光度就是用来衡量光被吸收程度的一个物理量。吸光度用A表示。

用仪器测定时应尽上使溶液透光度在T=15%~65%，相应的吸光度为A=0.20~0.80.。当溶液的吸光度或透光率不再范围时，可以通过改变溶液浓度及选择不同厚度的比色皿来控制。

一般物质的吸光度都在1以内，其中最适宜的吸光度在0.2-0.8之间又因为吸光度在分光光度计上的表盘读数是按照对数尺度刻分的。那么经过一些列的相关实验已经证实，当吸光度在0.2-0.8的范围内的时候，读取的读数的误差是最小的。

关于光度计使用中吸光度的问题!

根据朗伯比尔定律，吸光度与溶液浓度成正比，一般在0.3到0.8可用，如果太低增大浓度，太大减小浓度。望***纳，谢谢。

强度相同的两束交替光，一束通过参比溶液，一束通过样品溶液。检测器接收参比信号和样品信号，把它们的差值转变为电信号，经放大后显示出来。不管I0多大，得出参比信号和样品信号的差值是一定的。因此单波长双光束分光光度计测定试液的吸光度A与光源的入射光I0的强度无关。

在分光光度计上吸光度的标度是对数函数。从0到0.1间隔较大，吸光度越大表盘读数间隔越小（精密度差）。 通常，吸光度范围被控制在不大于0.5 处。

先在暗箱盖开启状态下调节零点调节器，使读数盘指针指向t=0处。然后盖上暗箱盖，调节“100”调节器，使空白管的t=100，指针稳定后逐步拉出样品滑竿，分别读出测定管的光密度值 。

紫外可见分光光度计的性能指标调校实验中,如何进行光度准确度校正?

1、紫外可见分光光度计的吸光率的准确度，可以通过多去几次样品测得其值，取其平均值，但是有时候会因为取样原因造成每个值之间相差很大，这就说明了取样的技术与水平决定了结果的重现性。对于测定溶液中的离子，那么准确度和重现性就相对比较高。

2、打开试样室盖，调节“0”旋钮，使数字显示为“0。00”盖上试样室盖，将比色皿架处于蒸馏水校正位置，使光电管受光，调节透过率“100％”旋钮，使字显示为“100。0”预热后，按（3）连续几次调整“0”和“100％”，紫外分光光度计即可进行测定工作。

3、在试样量允许时， 试样应选择靠近最佳吸光度值（ 0. 434Ab s ） 的浓度。从理论上讲， 吸光度值为最佳值0. 434Abs 时， 分析误差最小。如果被测试样太浓时， 应向靠近0. 434Ab s 的方向稀释。在不同的吸光度上测试， 相对误差和绝对误差都不同。

4、分光光度计在使用过程中，由于机械振动，温度变化、灯丝变形、灯座松动或更换灯泡等原因，经常会引起刻度盘上的波长读数与实际通过溶液的波长不符合的现象，从而导致仪器灵敏度降低，影响测定结果的精度，需要经常校正。

5、【答案】：校正波长的目的是为了检验波长刻度与实际波长的符合程度，并通过适当的方法进行修正，以消除因波长刻度的误差引起的光度测定误差，提高测定的准确性。校正波长一般使用分光光度计。

6、下表为I级分光光度计的主要性能指标的要求（其它级仪器的性能指标要求见相关的检定规程）。（3） 校准方法 紫外、可见分光光度计的校准主要是通过对一些有数值型的技术指标测试来进行。

吸光度不在0.2-0.8范围内,怎样使误差在范围内

1、对浓度过高或过低的组分，***用控制取样量、稀释试液或萃取富集，以及改变比色皿厚度等方法使吸光度落在最佳范围0.2~0.7内，提高测定的准确度。

2、因为吸光度在分光光度计上的表盘读数是按对数尺度刻分的（透射率是按十进制刻画的）。 吸光度在0．2～0．8的范围内的读数误差最小。调整标样和待测样的浓度使其吸收正好落在这一范围内。

3、按照光度误差的要求，测定的吸光度，应该在0.2~0.8的范围内。必须做一个标准曲线，曲线的起始值和终值必须大于你要测的范围，得到曲线是否平滑，其误差是否在所需要的范围内。以上条件都衡量后才能确定能使用的吸光度范围。

4、按照国标走一般没有问题的，如果想刻意控制的话只能反复稀释试验了，另外国标的标准曲线的最后一个点一般都在这个范围，你可以试试。

紫外分光光度计吸光度校正需要用到的溶液多少升

浓度大了吸光度会很大，测的值就不准了，做个标准曲线就能看出来。

根据朗伯比尔定律得出：当一束平行单色光通过一定液层厚度的有色溶液时，由于溶质吸收了光能，光的强度就会减弱。溶液浓度越大，液层越厚，入射光越强，光被吸收的就越多。如果用公式表示的话，就可以表示为表示为：A=E*C*L（A为吸光度，C为溶液浓度，L为液层厚度）。

深入维护：专业技巧更换氘灯时，先关闭电源，细致操作，确保安全。校准波长和透射比，使用标准溶液如苯蒸气和重铬酸钾，检查并调整仪器至最佳状态。吸收池的配套性检查不容忽视，确保每个池子的光程准确无误，这对于定量分析的精度至关重要。通过细致的校正与配对，提升每一次测量的可靠性。

用仪器测定时应尽上使溶液透光度在T=15%~65%，相应的吸光度为A=0.20~0.80.。当溶液的吸光度或透光率不再范围时，可以通过改变溶液浓度及选择不同厚度的比色皿来控制。

呵呵，原则是用你溶解溶质的液体进行校正。在你的实验中，就应该是硫酸，不过你得注意硫酸的浓度。因为pH值的不同对最大吸收波长会有影响。

溶液浓度越大，液层越厚，入射光越强，则光被吸收的就越多。用公式表示为：A=E*C*L（A为吸光度，C为溶液浓度，L为液层厚度）。E是物质在一定波长下的特征常数，与对光吸收的灵敏度呈正相关。该公式适用于有色溶液和均匀非散射的吸光物质（如：固、液、气）。

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