1、基于紫外可见分光光度法,利用物质分子对紫外可见光谱区的辐射吸收来进行分析的一种分析仪器。紫外可见分光光度计是一种基于紫外可见分光光度法的分析仪器,利用物质分子对紫外可见光谱区辐射的吸收特性来进行定量分析。
2、紫外-可见分光光度计是基于紫外可见分光光度法原理,利用物质分子对紫外可见光谱区的辐射吸收来进行分析的一种分析仪器。以下的内容是小编特别给您介绍的关于紫外-可见分光光度计基本原理、用途、使用注意事项。紫外-可见分光光度计主要由光源、单色器、吸收池、检测器和信号处理器等部件组成。
3、探索紫外可见分光光度计的奥秘与广泛应用 自1918年美国科学家的革新以来,紫外-可见分光光度计已成为科学进步的见证,催生了自动化记录和打印等技术的诞生。这个精密仪器的出现,无疑极大地推动了我们的生活与工作。接下来,让我们深入解析其工作原理及实际应用领域。
4、光谱仪的工作原理 元素的原子在激发光源的作用下发射谱线,谱线经光栅分光后形成光谱,每种元素都有自己的特征谱线,谱线的强度可以代表试样中元素的含量,高利通光谱仪用光电检测器将谱线的辐射能转换成电能。检测输出的信号,经加工处理,在读出装置上显示出来。
按所吸收光的波长区域不同,分为紫外分光光度法和可见分光光度法,合称为紫外—可见分光光度法。
紫外可见光光度计原理:分子的紫外可见吸收光谱是由于分子中的某些基团吸收了紫外可见辐射光后,发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱。紫外可见分光光度计是由光源、单色器、吸收池、检测器和信号处理器等部件组成。光源的功能是提供足够强度的、稳定的连续光谱。
由上式可以看出,被测物质对单色光的吸光度与被测物质的浓度成正比。实际测试时,单色光通过被测物质达到光电接收器,由光电倍增管或光电池转换成光电流,而光电流的强弱决定了吸光度值A的大小。假定通过参比样品的光电流为I。
紫外-可见分光光度法在190~800nm波长范围内测定物质的吸光度,用于鉴别、杂质检查和定量测定。当光穿过被测物质溶液时,物质对光的吸收程度随光的波长不同而变化。因此,通过测定物质在不同波长处的吸光度,并绘制其吸光度与波长的关系图即得被测物质的吸收光谱。
紫外可见分光光度计的原理其实相对比较简单,我们都知道就是物质在吸收光谱之后,其本身的含义就是物质里面的分子以及原子有了一定波长光能量。在这些能量的基础上出现分子振动的能级跃迁以及电子能级跃迁这样的效果。每一个物质的分子是不一样的,它们的组成也是相差很大。
紫外——可见分光光度计用于定量分析的基本方法是:用选定波长的单色光照射被测物质的溶液,测量它的吸光度,再根据吸光度计算被测组分的含量。测量的理论依据是“光吸收定律”,即朗伯——比耳定律,当一适当波长的单色光照射吸光物质的溶液时,其吸光度与吸光物质浓度和透光液层厚度的乘积成正比。
分光光度法则是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度,对该物质进行定性和定量分析。常用的波长范围为:(1)200~400nm的紫外光区(2)400~760nm的可见光区,(3)5~25μm(按波数计为4000cm-1~400cm-1)的红外光区。
分光光度计在医学领域主要应用于:核酸的定量、蛋白质的直接定量(UV法)、比色法蛋白质定量。核酸的定量 核酸的定量是分光光度计使用频率最高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸,单链、双链DNA,以及RNA。核酸的最高吸收峰的吸收波长260 nm。每种核酸的分子构成不一,因此其换算系数不同。
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