分光光度计在使用过程中,由于机械振动,温度变化、灯丝变形、灯座松动或更换灯泡等原因,经常会引起刻度盘上的波长读数与实际通过溶液的波长不符合的现象,从而导致仪器灵敏度降低,影响测定结果的精度,需要经常校正。
因为分光光度计的工作原理就是依据朗伯比尔定律设计的,待测物质在特定波长下,该波长是待测物最大吸收波长之一,还是最具特征的波长,在一定浓度范围内,遵循朗伯比尔定律。必须随时进行波长校正,保证随时设定的波长的真实性,使之与待测物的特征吸收波长一致,才能保证测试结果的准确性。
分光光度计:又称光谱仪(spectrometer),是将成分复杂的光,分解为光谱线的科学仪器。测量范围一般包括波长范围为380~780nm的可见光区和波长范围为200~380nm的紫外光区。不同的光源都有其特有的发射光谱,因此可***用不同的发光体作为仪器的光源。
利用分光光度法或技术工作的仪器叫分光光度计,可分为如下几类: 分光光度计检定(测试)的主要项目对分析结果的影响1)波长准确度分光光度法原理要求照射在样品池上的单色光必须对应于样品吸收光谱中的某一个吸收峰的波长。由于仪器的制造和调整误差,单色光的实际波长与仪器的波长读数值间都存在一定的误差。
1、校正波长或波数 可用具有窄吸收带的溶液,滤光片或蒸气来校正所需要的光波范围。如果要求很高的精密度时,可用放电灯泡发射的射线来校正。有的光谱仪其上已装有一个为校正用的灯。
2、首先在使用紫外分光光度计前,用户应先了解仪器的结构和工作原理,以及各个操作旋钮的功能。在未接通电源前,应对仪器进行检查,电源线接线应牢固,通地要良好,各个调节旋钮的起始位置要正确,然后接通电源开关。开启电源,指示灯亮,选择开关置于“T” ,波长调至测试用波长。仪器预热30 分钟。
3、紫外分光光度计的校正方法:分光光度法的最重要的一个物理化学量是吸光度。为了获得准确的研究结果,准确测得样品溶液的吸光度是非常重要的。一般,分析结果的不可靠性与偶然误差和系统误差有关。
4、用设置键和∧键或 ∨键设置您想要的分析波长。如没有进行上步操作,仪器将不会变换到 您想要的分析波长。根据分析规程,每当分析波长改变时,必须重新调整0ABS/100%T。
5、暗电流是一种干扰,有一个黑色的比色皿大小的黑挡块,用于校正真暗电流。将黑挡块放入样品池中,在电脑上或者单机屏幕上寻找到“暗电流校正”选项 点击,即可自动校正。没有说哪个品牌的仪器必不必要的,只要出现由暗电流产生的误差,仪器就都需要进行暗电流校正。有事请追问。
6、你先看看说明书,好想是在529nm左右是黄绿色光,不是的话通过仪器上的波长调节螺丝调到黄绿色,然后从520nm开始用镨钕玻璃查看吸光度,记下数字,依次向上调节波长,间隔1-2nm,各自记录吸光度,看看最大吸收波长在多少,然后调节波长调节螺丝就。
1、浓度大了吸光度会很大,测的值就不准了,做个标准曲线就能看出来。
2、根据朗伯比尔定律得出:当一束平行单色光通过一定液层厚度的有色溶液时,由于溶质吸收了光能,光的强度就会减弱。溶液浓度越大,液层越厚,入射光越强,光被吸收的就越多。如果用公式表示的话,就可以表示为表示为:A=E*C*L(A为吸光度,C为溶液浓度,L为液层厚度)。
3、深入维护:专业技巧更换氘灯时,先关闭电源,细致操作,确保安全。校准波长和透射比,使用标准溶液如苯蒸气和重铬酸钾,检查并调整仪器至最佳状态。吸收池的配套性检查不容忽视,确保每个池子的光程准确无误,这对于定量分析的精度至关重要。通过细致的校正与配对,提升每一次测量的可靠性。
4、用仪器测定时应尽上使溶液透光度在T=15%~65%,相应的吸光度为A=0.20~0.80.。当溶液的吸光度或透光率不再范围时,可以通过改变溶液浓度及选择不同厚度的比色皿来控制。
不同的光源都有其特有的发射光谱,因此可***用不同的发光体作为仪器的光源。钨灯的发射光谱:钨灯光源所发出的380~780nm波长的光谱光通过三棱镜折射后,可得到由红、橙、黄、绿、蓝、靛、紫组成的连续色谱;该色谱可作为可见光分光光度计的光源。
型分光光度计,用AUTO-ZERO键校正。开机,预热15分钟。按(MODE)键将测试方式设置至第一栏T(透过率)状态。打开样品室盖,放入黑体,盖上样品室盖,按0%键,至显示000.0为止。
A=Kbc中的系数K是波长的函数,波长改变了K就改变,因此改变波长必须重新校正零点、重新扣除背景(空白)。
测得的数据都是样品相对于空白参比得到的相对数据,否则测出来的数据没有准确性.“分光光度计***用一个可以产生多个波长的光源,通过系列分光装置,从而产生特定波长的光源,光线透过测试的样品后,部分光线被吸收,计算样品的吸光值,从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。
按一下ADJ(Adjust)校正键,则误差数据存入微机并自动校正为100%T/OA。这项操作在每次开机后只需作一次,若所用的比色皿配对性很好,可免去这一步骤。开机时,校正系数初始值为1,即相当于不校正。d.用同比色皿盛被测溶液放进同一试样槽,则显示校正后的透过率或吸光率。
分光光度计:又称光谱仪(spectrometer),是将成分复杂的光,分解为光谱线的科学仪器。测量范围一般包括波长范围为380~780nm的可见光区和波长范围为200~380nm的紫外光区。不同的光源都有其特有的发射光谱,因此可***用不同的发光体作为仪器的光源。
你先看看说明书,好想是在529nm左右是黄绿色光,不是的话通过仪器上的波长调节螺丝调到黄绿色,然后从520nm开始用镨钕玻璃查看吸光度,记下数字,依次向上调节波长,间隔1-2nm,各自记录吸光度,看看最大吸收波长在多少,然后调节波长调节螺丝就。
MC型紫外可见分光光度计是一种多功能、单光束的微机程控型紫外分光光度计,它具有全波段及多波段的波长扫描功能,在检定中,我们常用钬玻璃来作波长的检测。
1、打开吸收池暗室盖(光门自动关闭),调节[0% T]旋钮,使数字显示为“00.0”,盖上吸收池盖,将参比溶液置于光路,使光电管受光,调节透光率[100% T] 旋钮,使数学显示为“100.0”。
2、开721-A分光光度计的开关,将比色池的盖子打开,通电20分钟使仪器预热。将波长旋至测定的波长。将空白液、校准液或待测液放入比色池,将空白液置于光路中。将开关置于T位,打开比色池盖子,用光量粗调和光量细调调节T为0.0,关上 比色池盖子,调节T为100.0。
3、调“0”:将样品室盖打开, 在T方式下按“0%”,此时仪器自动校正后显示“0.000”。调“100%”:将空白液拉入光路,在T方式下按“100%”, 此时仪器自动校正后显示“100”, 在A方式下显示为“0.000”。将三样品液分别拉入光路中,在A方式下显示测得样品的吸光度。
4、要确定您的比色皿是否用了玻璃材料的了,如果没有尝试一下对空气是否能调到,如果对空气都调不到,那仪器氘灯坏了,需要保修。如果对空气能调到100%,把样品空白放进去测一下,透过率很低说明空白样品浓度太高了。
关于光谱光度计校准,以及光谱光度计检定规程的相关信息分享结束,感谢你的耐心阅读,希望对你有所帮助。
上一篇
高效液相色谱仪气相色谱仪