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分光光度计t值

文章阐述了关于分光光度计t值，以及分光光度计concentration的信息，欢迎批评指正。

简述信息一览：

1、指针的吧，以上海精科的721型为代表，表头刻度有两排，上面的是A值，吸光度；下面的是T值，透射比。T值的刻度是均匀的，从0%到100%，每格代表1%.上面的A值是和T值成负对数关系的，它的刻度是不均匀的，A值的零点是T值的100%，A值越大，每格多代表的A值就越高。

2、分光光度计通常***用***用悬镜式光点反射检流计。在检流计标尺上，有百分透光率T%和吸光度A两种刻度。由于吸光度与透光率是负对数关系，透光率标尺的刻度是均匀的，而吸光度标尺的刻度是不均匀的。

（图片来源网络，侵删）

3、T表示透光度（Trans）， A表示吸光度（Absorbance）， C表示浓度（Conc）， F表示斜率（Factor）。

4、吸光度A与透光率T之间的关系：分光光度法测定时，一般要求吸光度A在0.2-0.8之间，因为当吸光度在0.187-0.824之间时，浓度的相对误差在2%以内。分光光度法：通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度，对该物质进行定性和定量分析的方法。

ABS——吸光度方式、T——透透射比方式、C——直读浓度方式、F——斜率，MODE——是选择模式，按一下此键为吸光度A模式，再按一下为透光度T模式，以此类推，至浓度C模式，斜率F模式。PC打印，0%T调零，100%T调满度。

（图片来源网络，侵删）

表示透光率百分百正常。透光率调100相当于吸光值调0，表示透光率百分百正常。紫外可见分光光度计是基于紫外可见分光光度法原理，利用物质分子对紫外可见光谱区的辐射吸收来进行分析的一种分析仪器。

可见分光光度计灵敏度旋钮在哪？回答是：722可见分光光度计灵敏度旋钮在，722可见分光光度计按键说明〈模式〉键：工作方式切换键，上依次显示〔T〕（透射比），〔A〕（吸光度），〔C〕（浓度），〔F〕（计算因子）。〈100%T〉/〈〉键：在T模式时为调满度键。

分光光度计都一样的操作方法，只不过有的***用的电子技术更高明而已。无非是先对仪器波长校正、在测空白样调基线（或调零），然后标准试剂的吸光度，最后测实际样品。

对纯溶剂来说，C=0。其吸光度也为0（根据朗伯-比尔定律）故应打开试样室盖（通向光电管的光门被关闭），调节0%T旋钮，使溶剂的透光强度为0；盖上样品盖（通向光电管的光门被打开），调节透过率100%T旋钮，使溶剂的透光强度信号为100（纯溶剂C=0，吸光度为0，透光度T应为100）。

你应该是用分光光度计做DNA，蛋白质的测量的，测量完260测280的时候是需要调零的，因为在做溶液的时候。在每个波长的吸收值是不一样的，只能通过调零来进行校正，现在的很多厂家的紫外可见分光光度计都带有DNA，蛋白质测量功能，自己测量再算很麻烦，建议换台新的了。

一般物质在不同波长下的吸光度是不一样的，即使水也是如此.所以用作空白的溶液在A波长下调零后到B波长下可能就不是零了，所以是需要重新调零的.光的波长与光能的关系：E=C/λ，即：光速与光波之比=光能，波长不同，光能不同，分光光度计调零、调满度的目的就是要用所需测试波长的光能作基准对照。

空白也有可能会吸收部分光的，因此需要调零，以扣除空白的影响，样品与空白间吸光值的差值才会与样品中被测物质含量成正比。一般来说超过1后OD与样品浓度就不成线性了。超过1说明透光率在10%以下，一般来说在分析仪器量程的头和尾准确度都较低。

型可见分光光度计操作规程打开仪器开关之前，先确认仪器样品室处在第一槽位。光路上有东西将影响仪器自检甚至造成仪器故障。打开仪器开关，使仪器预热加温20分钟。仪器接通电源后即进入自检状态，自检结束仪器自动停在吸光度测试方式。用波长设置旋钮将波长设置在将要使用的分析波长位置上。

旋转波长调节器，选择测定所需的单色光波长。2）放入空白溶液和待测溶液，使空白溶液置于光路中，盖上比色皿室箱盖，使光电管受光，调节按键使τ 值为100%处。

-分光光度计接通电源，打开仪器开关，掀开样品室暗箱盖，预热10分钟。将灵敏度开关调至“1”档（若零点调节器调不到“0”时，需选用较高档。）根据所需波长转动波长选择钮。将空白液及测定液分别倒入比色杯3/4处，用擦镜纸擦清外壁，放入样品室内，使空白管对准光路。

按1选择光度计模式，光度计模式为定波长的吸光度、透射比和能量方式测量。3 在光度计模式下按“设置波长”键，可设置需要的测试波长。4 挡住光路或打开仪器盖子，按“调零/调满度”键，调零。5盖上仪器盖子，按“调零/调满度”键，调满度。3 .定量分析 1消除比色皿配对误差。

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