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分光光度法如何确定测量波长

简述信息一览：

1、等吸收双波长法：选择波长原则：干扰组分b在这两个波长应具有相同吸光度；被测组分在这两个波长处吸光度差值应足够大。

2、第一，最***长处被测物响应值最大，检测灵敏度最高。第二，可以有效排除其它共存杂质干扰，使测定结果准确可靠。第三，在最大吸收波长附近，吸光度A的值较稳定，波动性不大，测量误差较小。所以，在最***长处容易得到较好的线性关系。

（图片来源网络，侵删）

3、溶剂在紫外光区有吸收，截止波长：就是溶剂吸光度为1 AU时的波长，紫外检测器分析时的波长要在截止波长之上。当小于截止波长的辐射通过溶剂时，溶剂对此辐射产生强烈吸收，它严重干扰组分的吸收测量。

紫外分光光度计都自带波长自检功能，其原理是仪器内部利用已设定的氘灯或者钨灯的特征波峰与同样设定波长下波峰做比对，并根据内部设定值做修正。紫外分光光度计，就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。紫外分光光度计可以在紫外可见光区任意选择不同波长的光。

在不同波长下测量待分析离子溶液的分光度，根据数据制作吸收曲线，曲线最高点对应的波长即为定量分析所用测量波长。因为在最大吸光度下测量，数据更大，能减小误差，也方便实验数据的记录与处理。

（图片来源网络，侵删）

紫外可见分光光度法合适的检测波长范围是200～800nm。紫外可见光分光光度计工作原理与红外光谱、拉曼光谱的工作原理近似，***用一定频率的紫外可见光照射所需检测的物质，引起物质中电子跃迁，从而表现出随着吸收波长变化而引起的光谱变化，记录光谱变化形成分析数据。

在紫外可见分光光度法中，选择入射光波长的原则是吸收最大和干扰最小。选择入射光波长使被测物质具有最大的吸收是关键。一般来说，被测物质的吸光度随波长的增加而减小，因此在波长范围的上限可以得到最大的吸收。对于大多数有机化合物和金属络合物，在紫外区可以找到最大吸收峰。

仪器的狭缝波带宽度应小于供试品吸收带的半宽度，否则测得的吸收度会偏低；狭缝宽度的选择，应以减小狭缝宽度时供试品的吸收度不再增大为准，由于吸收池和溶剂本身可能有空白吸收，因此测定供试品的吸光度后应减去空白读数，或由仪器自动扣除空白读数后再计算含量。

选择合适溶液，确定大体吸收波长的范围，如在250nm到450nm之间，每隔20nm或15nm测一次吸光度，作出吸光度—波长的关系曲线，吸光度最高的那个波长就是最佳吸收波长了。

实践五高锰酸钾吸收光谱曲线的绘制及含量测定实践目的掌握紫外-可见分光光度计的操作方法。熟悉紫外-可见分光光度计的基本构造及作用。会依据吸收光谱曲线确定最大吸收波长。会用标准曲线法测定高锰酸钾样品溶液的含量。

确认检测物的吸收峰范围、根据检测物的吸收峰范围，调节参比溶液的浓度。根据查询分析测试百科网得知。确认检测物的吸收峰范围：不同的分子在紫外区有不同的吸收峰，需要确定所检测的物质在紫外区的吸收峰范围，以便于调节吸光度的区间。

算一下吸收波长。或者最常见的扫紫外图谱。找到最大吸收的波峰，或者是末端吸收也可以。大约就是这么个意思。a点就是一个波峰。大约270-280nm，然后末端是200-210nm位置。不同的物质吸收波长不一样，具体的扫过才知道。如果有pda检测器，扫一下全波长也可以测出来。

你可以这样做，用同一浓度的溶液，选取不同波长进行测试，确定最佳测试波长后再进行不同浓度的紫外测试。比如先以100nm为间隔，找到最大吸收波长的区段，在以20nm为间隔寻找，一般这样重复三次就能得到很高的精确度了。波长一般精确到10nm即可。

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