叶绿素分光光度计波长

文章阐述了关于叶绿素分光光度计，以及叶绿素分光光度计波长的信息，欢迎批评指正。

简述信息一览：

• 1、叶绿素测定
• 2、叶绿素含量的测定分光光度法pdf
• 3、分光光度计测量叶绿素,为什么要将叶绿素冷藏后在进行测定
• 4、如何利用紫外分光光度计测定叶绿素的含量?
• 5、测定叶绿素含量实验中,使用分光光度计应注意哪些问题

叶绿素测定

叶绿素测定未过滤可以尝试以下步骤来解决这个问题：离心沉淀：将未过滤的样品放入离心管中，进行高速离心操作。在离心的过程中，叶绿素会沉淀在离心管的底部，而其他固体颗粒或杂质会在上清液中。弃去上清液：小心倾倒掉离心管中的上清液，以避免误差和干扰。注意不要打扰到沉淀的叶绿素。

因为分光光度法的要求。测定叶绿素a含量需要利用分光光度计测定叶绿素提取液在最大吸收多个波长下的吸光值，即可用朗伯—比尔定律计算出提取液中各色素的含量。叶绿素a和叶绿素b在645nm和663nm处有最大吸收，且两吸收曲线相交于652nm处。

叶绿素是一类与光合作用有关的最重要的色素。光合作用是通过合成一些有机化合物将光能转变为化学能的过程。叶绿素实际上存在于所有能营造光合作用的生物体，包括绿色植物、原核的蓝绿藻（蓝菌）和真核的藻类。叶绿素从光中吸收能量，然后能量被用来将二氧化碳转变为碳水化合物。

叶绿素含量的测定分光光度法pdf

叶绿素含量的测定分光光度法pdf如下 实验方法原理 叶绿素广泛存在于果蔬等绿色植物组织中，并在植物细胞中与蛋白质结合成叶绿体。

DC=D652×1000/35（mg/L）………（9）因此，利用（5）、（6）式可分别计算叶绿素a与b含量，利用（7）式或（9）式可计算叶绿素总量。叶绿体色素的提取液中除含有叶绿素a与b外，还含有叶黄素和胡萝卜素，因为叶黄素和胡萝卜素的吸收光谱均在蓝光区，故不会干扰叶绿素含量在红光区的分光光度法测定。

叶绿素含量的测定方法：分光光度法。分光光度法是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度，对该物质进行定性和定量分析的方法。它具有灵敏度高、操作简便、快速等优点，是生物化学实验中最常用的实验方法。许多物质的测定都***用分光光度法。

利用分光光度法测定叶绿素含量是依据Lambert-Beer定律，数学表达式为A=Kbc。其中，A为吸光度；K为吸光系数；b为溶液的厚度；c为溶液浓度。叶绿素a，b的丙酮溶液在可见光范围内的最大吸收峰分别在663nm和645nm处。

叶绿素a、b含量 分光光度法 叶绿素a、b在长波方面最大吸收峰分别位于663nm和645nm。

因此，在有其它灵敏方便的定量分析方法的情况下，一般不考虑这个吸收峰。如果溶液中有多种吸光物质，则此混合液在某一波长下总吸光度等于各组分在相应波长下吸光度的总和，这就是吸光度的加和性。本实验测定提取液中叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素的含量，只需测定该提取液在三个特定波长下的。

分光光度计测量叶绿素,为什么要将叶绿素冷藏后在进行测定

步骤： （1）将取自叶片的样品加入95%乙醇，研磨均匀； （2）离心沉淀后，用分光光度计分别在663nm和645nm两个波长下测定提取液的吸光度； （3）根据计算公式计算出叶绿素a和叶绿素b的含量。

叶绿素中的镁可以被氢离子所取代而成褐色的去镁叶绿素。去镁叶绿素遇铜则成为铜代叶绿素，铜代叶绿素很稳定，在光下不易破坏，故常用此法制作绿色多汁植物的浸渍标本。 叶绿素与类胡萝卜素都具有光学活性，表现出一定的吸收光谱，可用分光光度计精确测定。

若不到位，将影响到测试值的重复性或准确度。最后，还应保证比色皿的清洁度，延长其使用寿命。2）干燥剂的使用问题。干燥剂失效将导致 a）数显不稳、无法调“0”点或“100%”点（电路或光电管受潮）。b）反射镜发霉或沾污，影响光效率、杂散光增加。

因为分光光度法的要求。测定叶绿素a含量需要利用分光光度计测定叶绿素提取液在最大吸收多个波长下的吸光值，即可用朗伯—比尔定律计算出提取液中各色素的含量。叶绿素a和叶绿素b在645nm和663nm处有最大吸收，且两吸收曲线相交于652nm处。

在农产品和食品领域，紫外可见分光光度计能够检测包括蛋白质、赖氨酸、葡萄糖、维生素C、硝酸盐、亚硝酸盐、砷和汞等多种成分，为食品安全评估提供科学依据。在植物生化分析中，它能够精确测量叶绿素含量、全氮水平以及酶的活力，对于研究植物生理过程和环境影响具有重要意义。

将空白液及测定液分别倒入比色杯3/4处，用擦镜纸擦清外壁，放入样品室内，使空白管对准光路。在暗箱盖开启状态下调节零点调节器，使读数盘指针指向t=0处。盖上暗箱盖，调节“100”调节器，使空白管的t=100，指针稳定后逐步拉出样品滑竿，分别读出测定管的光密度值，并记录。

如何利用紫外分光光度计测定叶绿素的含量?

光密度测定：将叶绿素提取液置于紫外可见分光光度计或分光光度计中，选择适当的波长进行测定。一般可以选择440 nm和663 nm两个波长。分别测量样品溶液在这两个波长下的吸光度。叶绿素浓度计算：根据光密度测定结果，使用比色法或标准曲线法计算出叶绿素的浓度。

叶绿素的含量测定方法有多种，其中主要有：原子吸收光谱法：通过测定镁元素的含量，进而间接计算叶绿素的含量。分光光度法：利用分光光度计测定叶绿素提取液在最大吸收波长下的吸光值，即可用朗伯—比尔定律计算出提取液中各色素的含量。

叶绿素含量的测定方法：分光光度法。分光光度法是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度，对该物质进行定性和定量分析的方法。它具有灵敏度高、操作简便、快速等优点，是生物化学实验中最常用的实验方法。许多物质的测定都***用分光光度法。

因为分光光度法的要求。测定叶绿素a含量需要利用分光光度计测定叶绿素提取液在最大吸收多个波长下的吸光值，即可用朗伯—比尔定律计算出提取液中各色素的含量。叶绿素a和叶绿素b在645nm和663nm处有最大吸收，且两吸收曲线相交于652nm处。

辣椒植株叶绿素含量的测定方法，取材，测定如下：材料、仪器设备及试剂 （一）材料：新鲜（或烘干）的植物叶片。（二）仪器设备： 分光光度计； 电子顶载天平（感量0.01g）； 研钵； 棕色容量瓶； 小漏斗； 定量滤纸； 吸水纸； 擦境纸； 滴管。

a）数显不稳、无法调“0”点或“100%”点（电路或光电管受潮）。b）反射镜发霉或沾污，影响光效率、杂散光增加。鉴于上述原因，分光光度计的放置地点应远离水池等湿度大的地方、干燥剂应定期更换或烘烤。3）仪器的工作环境。

测定叶绿素含量实验中,使用分光光度计应注意哪些问题

1、辣椒植株叶绿素含量的测定方法，取材，测定如下：材料、仪器设备及试剂 （一）材料：新鲜（或烘干）的植物叶片。（二）仪器设备： 分光光度计； 电子顶载天平（感量0.01g）； 研钵； 棕色容量瓶； 小漏斗； 定量滤纸； 吸水纸； 擦境纸； 滴管。

2、根据叶绿体色素提取液对可见光谱的吸收，利用分光光度计在某一特定波长下测定其消光度，即可用公式计算出提取液中各色素的含量。

3、在农产品和食品领域，紫外可见分光光度计能够检测包括蛋白质、赖氨酸、葡萄糖、维生素C、硝酸盐、亚硝酸盐、砷和汞等多种成分，为食品安全评估提供科学依据。在植物生化分析中，它能够精确测量叶绿素含量、全氮水平以及酶的活力，对于研究植物生理过程和环境影响具有重要意义。

4、可见光波段对于太阳光来说是一个要么量大并且单个光子能量不太低，要么单个光子能量高但没高到破坏性太大的范围。这个不管对于视觉还是光合作用都是一个最有效率的范围（并且光合作用的适用范围更窄）。只是我们的可见波段和光合作用吸收的波段重合了而已。

5、可以参考一下《水和废水监测分析方法》（第四版）649页之后的几段。

6、酒精法测定叶绿素含量 原理：将叶片样品用乙醇等有机溶剂提取叶绿素，然后用分光光度计在不同波长下测定叶绿素的吸光度，计算出叶绿素含量。

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