分光光度计测定值范围

文章阐述了关于分光光度计测定值范围，以及分光光度计计量标准的信息，欢迎批评指正。

简述信息一览：

• 1、可见分光光度计做工作曲线时,测得的吸光度数值有没有什么要求?
• 2、722s分光光度计浓度显示范围0-1999是什么意思
• 3、荧光分光光度计适用于什么范围?
• 4、分光光度计的光谱范围
• 5、可见分光光度计测定标准曲线的值太小了,线性度还是挺好的,只有0.04-0...
• 6、分光光度计测样时选0.5cm光经还是1cm的光经?原则是什么?

可见分光光度计做工作曲线时,测得的吸光度数值有没有什么要求?

对于分光光度法，做工作曲线线性很好的A值范围在0.2到0之间，低于0.2或大于0，时，曲线比较平滑，线性不好。当然，这样说是指你测出来的标准样品的吸光度跨度范围大，既有低于0.2，或者还包含高于0的，这样会影响整体的线性相关度。

朗伯比尔定律告诉我们，吸光度值不在0.2~0.8范围之内，测定误差将加大。如果你的测定误差允许，是可以带进标准曲线计算的（当然不能超出太远如在0.1~0还是可以的）。

吸光度超过1肯定不合适了，已经超出了标准曲线的范围。同样样品的吸光度高于标准这么高，当然是降低样品的浓度呢，也就是稀释几倍即可。根据之前的经验以及计算，吸光值在0.43左右是最佳的。

紫外分光光度计，就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。紫外分光光度计可以在紫外可见光区任意选择不同波长的光。物质的吸收光谱就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量，相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。

每种仪器测试同一样品，会因通过入射狭缝光源能量、光谱带宽、检测器的不同，吸光度不可能完全一致的。不用怀疑仪器的可用性 你是要测铂钴比色液吗？0.02的吸光度太低了，随便一些人为误差就足以致命了 。当吸光度在：0.2~0.8时测量误差在合理范围内。

就负一点，情况有：本身杯差造成的；确实没有待测离子，仪器轻微的波动造成的。问题六：用可见分光光度计测吸光度时为什么出现负值 我做邻二氮杂菲测铁的时候也遇到过，做第一份的结果为负值，以后几次恢复正常。比色皿必须配套使用，无论玻璃比色皿还是石英比色皿，不能混用。

722s分光光度计浓度显示范围0-1999是什么意思

1、光度计测量范围。722s分光光度计是一种用于测量光的强度或吸收的仪器。浓度显示范围0-1999表示光度计可以测量的物质浓度范围。在这个范围内，光度计可以准确测量样品的吸光度，将它转化为对应的浓度值。

2、你这里0－1999us是表示该计时器可以测量显示0－1999us的范围内的时间。

3、S型可见分光光度计仪器特点：722S型可见分光光度计***用低杂散光、高分辨率的单光束光路结构，仪器具有良好的稳定性，重现性。应用最新微机处理技术，使操作更为方便，几个按键就能完成测试，并具有自动调校0%T和100%T等控制功能及多种方法的数据处理功能。

4、分光光度计的基本原理是溶液中的物质在光的照射激发下，产生了对光吸收的效应，物质对光的吸收是具有选择性的，各种不同的物质都具有其各自的吸收光谱，因此当某单色光通过溶液时，其能量就会被吸收而减弱，光能量减弱的程度和物质的浓度有一定的比例关系，也即符合于比色原理---比耳定律。

5、在干扰光控制上，722S的杂散光控制在360nm处低于0.1%T，保证了数据的纯净度。在长时间运行下，其稳定性保持在≤0.003/500nm/30min，显示出良好的长期稳定性。

6、S型可见分光光度计是一款专为可见光谱区域内物质含量的定量分析而设计的精密仪器，它在众多领域中得到了广泛应用，包括工厂、学校、冶金、农业、食品、生化、环保、石油化工和医疗卫生等单位的基础实验室。该仪器的核心原理是利用物质对特定波长单色光的选择性吸收特性进行分析。

荧光分光光度计适用于什么范围?

目的：规范F-4600荧光分光光度计的使用，保证仪器的正常运行。范围：适用于F-4600荧光分光光度计 职责：质量管理部检验中心、研发部化验员负责本规程的执行。质量管理部、研发部负责人负责本规程实施情况的监督检查。内容：1 仪器组成 荧光分光光度计，荧光池，配套系统，计算机，打印机。

其能提供包括激发光谱、发射光谱以及荧光强度、量子产率、荧光寿命、荧光偏振等许多物理参数，从各个角度反映了分子的成键和结构情况。通过对这些参数的测定， 不但可以做一般的定量分析， 而且还可以推断分子在各种环境下的构象变化， 从而阐明分子结构与功能之间的关系。

而且还可以推断分子在各种环境下的构象变化， 从而阐明分子结构与功能之间的关系。缺点：荧光的光强并不高，所以呈线性情况有时不很理想；某些反应荧光持续的时间较短；荧光的发散方向不集中，不像透射光那样集中，强度高；受某些离子的干扰影响，荧光会湮灭，试验速度必须要快。

如果该物质的浓度不同，它所发射的荧光强度就不同，测量物质的荧光强度可对其进行定量测定。荧光分析法的特点是灵敏度高、选择性好、样品用量少和操作简便。

分光光度计的光谱范围

包括波长范围为400~760 nm的可见光区和波长范围为200～400 nm的紫外光区.不同的光源都有其特有的发射光谱，因此可***用不同的发光体作为仪器的光源。

分光光度计的检测范围因其设计、制造工艺和用途而有所不同。一般来说，大多数实验室使用的分光光度计其检测范围覆盖了400-760nm的可见光区和200-400nm的紫外光区。这个范围基本上涵盖了绝大多数生物分子和有机化合物的吸收光谱。

分光光度计，又称光谱仪（spectrometer），是将成分复杂的光，分解为光谱线的科学仪器。测量范围一般包括波长范围为380~780 nm的可见光区和波长范围为200～380 nm的紫外光区。不同的光源都有其特有的发射光谱，因此可***用不同的发光体作为仪器的光源。

可见分光光度计测定标准曲线的值太小了,线性度还是挺好的,只有0.04-0...

1、对于分光光度法，做工作曲线线性很好的A值范围在0.2到0之间，低于0.2或大于0，时，曲线比较平滑，线性不好。当然，这样说是指你测出来的标准样品的吸光度跨度范围大，既有低于0.2，或者还包含高于0的，这样会影响整体的线性相关度。

2、器材： 可见光分光光度计、大试管15支、旋涡混合器等。 操作方法 （1）标准曲线的测定：取12支试管分两组，分别加入0，0.2，0.4，0.6，0.8，0毫升的标准蛋白质溶液，用水补足到1毫升，然后加入4毫升双缩脲试剂。充分摇匀后，在室温（20～25℃）下放置30分钟，于540nm处进行比色测定。

3、酚试剂法 取6支试管标号，前5支试管分别加入不同浓度的标准蛋白溶液，最后一支试管加待测蛋白质溶液，不加标准蛋白溶液，每支试管液体总量加入蒸馏水补足而保持一致，混合均匀，在室温下放置30分钟，以未加蛋白质溶液的第一支试管作为空白对照，于650nm波长处测定各管中溶液的吸光度值。

4、在595nm下测定的吸光度值A595，与蛋白质浓度成正比。 Bradford法的突出优点是： （1）灵敏度高，据估计比Lowry法约高四倍，其最低蛋白质检测量可达1mg。这是因为蛋白质与染料结合后产生的颜色变化很大，蛋白质－染料复合物有更高的消光系数，因而光吸收值随蛋白质浓度的变化比Lowry法要大的多。

分光光度计测样时选0.5cm光经还是1cm的光经?原则是什么?

还有就是标曲用100mL的、待测液用25mL的，不是同规格比色管，对结果没有影响，因为紫外可见分光光度计的比色池用一套，厚度都是一样的，除非放在不一样的比色管用眼睛直接看才有影响，这样的话只能再倒在一样大的比色管里，总之只要浓度一样就可以了。

图87 砷化氢发生瓶及吸收管 本法最低检测质量为0.5μg。取50mL水样测定，检测下限为0.01mg/L。钴、镍、汞、银、铂、铬和钼可干扰砷化氢的发生，但一般水样中这些离子的浓度不产生干扰。水中锑的含量超过0.1mg/L时对测定有干扰。用本法测定砷的水样不宜用硝酸保存。

A=ECL C=A/EL A为吸收度；T为透光率；E为吸收系数，***用的表示方法是（E1％1cm），其物理意义为当溶液浓度为1%（g/ml），液层厚度为1cm时的吸收度数值；C为100ml溶液中所含被测物质的重量（按干燥品或无水物计算），g；L为液层厚度，cm。

先把标准品的浓度和每个标准品的吸光度用Excel生成标准曲线，同时得到公式。测量每个样本的吸光度。把吸光度代入公式，计算出对应的浓度.如果样本有稀释，还要乘以稀释倍数。DNA及RNA含量测定方法：取5ulDNA样品或4ulRNA样品加水到lml。用lml水做空白。把样品杯放在分光光度计比色槽上。

仪器和装置 分光光度计。汞蒸气发生瓶（250mL）。活芯气体***样管（包氏吸收管）（10mL）。锥形分液漏斗（50、250、500mL）。具塞比色管（25mL）。短颈平底烧瓶（500mL，24号标准口）。抽气泵。气体流量计。水流唧筒或医用注射器（100mL）。可调温电炉（1000W）。试剂 硫酸。盐酸。四氯化碳优级纯或经纯化处理。

、启动电脑，点击软件UV Probe， 出现对话框后，点击下部的“Connect”按钮。样品准备样品以适当的溶剂溶解。注意：不能用氯仿！因其可导致比色皿散架！二氯甲烷亦应慎用。常用溶剂为水及醇类。

关于分光光度计测定值范围，以及分光光度计计量标准的相关信息分享结束，感谢你的耐心阅读，希望对你有所帮助。