在本实验***用了3种空白溶液分别是试剂空白,溶剂空白,试样空白。这是772型分光光度计的性能检测,这三种空白溶液吸收池透光率可以区分光光度计的好坏,直接影响到测量结果的准确性。空白溶液含有和试样相似组分而不含待测成分的溶液,也叫空白溶液。
【】空白溶液的种类,包括:蒸馏水空白;溶剂空白;显色剂空白;试剂空白。
参比溶液和待测溶液。实验用分光光度计测定吸光度时,两个样品的空白液分别是参比溶液和待测溶液,参比溶液也就是作对照用的溶液,待测溶液就是要实验要测量的溶液。
1、为保持试剂和仪器的稳定性监控,试剂空白需要以蒸馏水为空白,记录真实数据。它具有灵敏度高、操作简便、快速等优点,是生物化学实验中最常用的实验方法。许多物质的测定都***用分光光度法。在分光光度计中,将不同波长的光连续地照射到一定浓度的样品溶液时,便可得到与不同波长相对应的吸收强度。
2、用纯净水做空白。试剂空白是指的用纯净水做空白,不含被测物质但其基体尽可能与试样溶液相似的溶液,在进行光度测量时,利用参比溶液来调节仪器的零点,可以消除由于吸收池壁及溶剂对入射光的反射和吸收带来的误差,并扣除干扰。
3、直白点讲,空白就是没有加待测样品的溶液;是为了扣除系统误差的。
4、【】是分光光度法定量依据“朗伯比尔定律”所要求的。【】设置空白对照组。就是要找出可信的空白值,才可以有效扣除不符合定量依据的吸光度。
5、此外,在某些特定类型的实验中,如荧光分光光度法或化学发光分析法等,空白管中的物质可能会被选择为具有特定荧光或化学发光特性的物质,以便于校正和标定实验结果。总之,分光光度计设置的空白管所装的物质的选择和使用是一个相对复杂的过程,需要综合考虑多种因素。
6、因为所用的试剂或使用的器皿,甚至所用的水等材料种可能含有少量的待测元素,为了扣除这部分非样品中的待测元素,就可以通过空白试验来矫正,也就是除了不加样品以外,其他操作都是完全一样的。
这很正常啊!表示样品在这两个波长处有吸收,但是吸收值的高低是不可能一样。至于你选择哪一个波长,不一定要看吸收值最大的,一定是线性关系最好的,而且针对你的样品而言,干扰最小的波长,这才是最关键的。
取此溶液用0.1mol/l HCL稀释成0.10,0.15,0.20,0.25,0.30,0.35,0.40和0.45μg/ml的多菌灵标准溶液。多菌灵的紫外吸收光谱取上述标准溶液,以0.1mol/l HCL为空白对照,在紫外分光光度计上逐一扫描,得紫外吸收光谱。
斜率检验:即检验分析方法的灵敏度,方法灵敏度是随实验条件的变化而改变的。在完全相同的分析条件下,仅由于操作中的随机误差导致的斜率变化不应超出一定的允许范围,此范围因分析方法的精度不同而异。
用10mm石英比色皿,在紫外分光光度计上,以无氨蒸馏水作参比,于波长220nm与275nm处测量吸光度,分别按下式求出除零浓度外其他校准系列的校正吸光度As和零浓度的校正吸光度Ab从及其差值Ar。
思考题简述紫外可见吸收光谱的产生。朗伯-比尔定律及其数学表达。光源的主要作用是什么?各种类型紫外可见分光光度计的特点。有机化合物的吸收带主要由哪几类跃迁产生?影响吸收谱带的因素有哪些?用Woodward规则计算计算共轭二烯、多烯烃、共轭烯酮类化合物π→π*跃迁最***长。
分光光度计的数值范围是在标准曲线的线性范围内,吸光度大于1的情况也可以。在COD的测定中,测的是重铬酸钾的吸光度,当重铬酸钾的浓度大时,吸光度大于1 。重铬酸钾的浓度越大,吸光度也越大。在反应后,重铬酸钾的浓度降低了,吸光度减小了。
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