可见分光光度计是一种结构简洁、使用方便的单光束分光光度计,基于样品对单色光的选择吸收特性可用于对样品进行定性和定量分析。其定量分析根据相对测量原理工作,即选定样品的溶剂(或空气 )作为标准试样,设定其透射比为100%,被测样品的透射比则相对于标准试样(或空气)而得到。
紫外可见分光光度计是一种用于分析物质对紫外和可见光谱区辐射的吸收情况的仪器。它由五个主要部分组成:光源、单色器、吸收池、检测器和信号处理器。以下是对每个部分的详细解释:光源:功能是提供足够强度、稳定的连续光谱。在紫外光区,通常使用氢灯或氘灯作为光源,而在可见光区,则常用钨灯或卤钨灯。
用来测量待测物质对可见光(400~760nm)的吸光度并进行定量分析的仪器,称为可见分光光度计。可在600nm测定细菌细胞密度。紫外可见光谱仪用来测量待测物质对可见光或紫外光(200~760nm)的吸光度并进行定量分析的仪器。可以测定核酸和蛋白的浓度,涡街流量计也可以测定细菌细胞密度。
可见分光光度计的作用,主要是测定有色溶液中测定物质的吸光度。具体应用是使用在:依据朗伯比尔定律(A=kbc)测定物质的吸光度A值,进行定量的目的。可见分光光度计是有光源(钨丝灯发出连续光谱)、比色皿(装有色溶液)、单色器(给出单色光)、检测器(读出吸光度值)。
可见分光光度法事基于物质对可见光的吸收,紫外是基于物质对紫外光的吸收而的。光源不同:可见用钨丝灯,紫外用氘灯。吸收池不同:可见的吸收池由玻璃制成,紫外的由玻璃制成。紫外可见分光光度计测量的范围大些,由于各种不同光波发射的灯管不同,紫外和可见光所用就不同。
可以分析溶液的吸收光谱(对不同波长入射光的吸收情况)而进行定性分析,也可以固定入射光波长去测量吸光度对物质进行定量分析。依使用的波长不同,有可见、紫外、红外分光光度计等。
1、可见分光光度计开机,开机前,检查电源插座是否接上;按“GO TO λ”键,输入设定波长;四个比色皿,其中R位置放置参比试样,其余三个放入待测试样。
2、在操作可见分光光度计时,首先要进行开机步骤:确保电源插座已接通;打开电源开关,仪器显示723C;仪器自检后,按MODE键,再按2键,设备显示DATA,进入基本模式。进入基本使用阶段:通过CTO键输入预设波长;将R位置放置参比试样,其余三个位置放置待测样品。
3、机器开关在机器的右侧,按下时会打开。有一个小屏幕,你可以按数字键来操作选项和测量光吸收值。按数字键1进入选项,包括当前参数、吸光度等。点击键盘上的GOTO键进行设置,一般设置为600。输入后直接按数字键就可以了。输入后回车,这是确认键。
4、分光光度计使用方法:(1)仪器预热。打开样品室盖(光门自动关闭)。开启电源,指示灯亮,仪器预热20 min。选择开关置于“T”旋钮,使数字显示为“00.0”。(2)旋动波长手轮,把所需波长对准刻度线。(3)将装有溶液的比色皿放置比色架中,令参比溶液置于光路。
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