今天给大家分享分光光度计检定规程,其中也会对分光光度计检定规程JJG178的内容是什么进行解释。
1、可见分光光度计是一种结构简洁、使用方便的单光束分光光度计,基于样品对单色光的选择吸收特性可用于对样品进行定性和定量分析。其定量分析根据相对测量原理工作,即选定样品的溶剂(或空气 )作为标准试样,设定其透射比为100%,被测样品的透射比则相对于标准试样(或空气)而得到。
2、仪器的工作原理 分光光度计的基本原理是溶液中的物质在光的照射激发下,产生了对光的 吸收效应,物质对光的吸收是具有选择性的。
3、两者的原理不同:原子吸收光谱仪的原理:仪器从光源辐射出具有待测元素特征谱线的光,通过试样蒸气时被蒸气中待测元素基态原子所吸收,由辐射特征谱线光被减弱的程度来测定试样中待测元素的含量。
4、紫外的可见光的一些区域可以区别光的波长。而物质的吸光光谱就是将它们自身的原子以及组成它们的分子通过吸收一些波长一定的入射光的能量,从而会出现分子之间以及电子的碰撞和振动,也就是实现了能级之间的跃迁。下面让我们更多的了解一下紫外分光光度计。
1、分光光度计的原理是:基于物质对光(对光的波长)的吸收具有选择性,不同的物质都有各自的吸收光带。分光光度计,又称光谱仪,是将成分复杂的光,分解为光谱线的科学仪器。测量范围一般包括波长范围为380~780 nm的可见光区和波长范围为200~380 nm的紫外光区。
2、分光光度计的基本原理是溶液中的物质在光的照射激发下,产生了对光吸收的效应,物质对光的吸收是具有选择性的,各种不同的物质都具有其各自的吸收光谱,因此当某单色光通过溶液时,其能量就会被吸收而减弱,光能量减弱的程度和物质的浓度有一定的比例关系,也即符合于比色原理---比耳定律。
3、分光光度计原理大致是***用一个可以产生多个波长的光源,通过系列分光装置,从而产生特定波长的光源,光线透过测试的样品后,部分光线被吸收,计算样品的吸光值,从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。
4、同时,不同的物质对不同波长的单色光呈现出不同的吸光度值,这一变化特征也就是分光光度法用于物质的定性定量分析的理论基础。
5、分光光度计原理:分光光度计是一种通过测量物质对光的吸收程度来确定物质浓度的仪器。在分光光度计实验中,通常使用一束特定波长的光照射待测溶液,然后测量光的透射率或吸光度,从而得到待测物质的浓度。显色剂的作用:显色剂是一种能够与待测物质发生化学反应并产生颜色变化的物质。
6、应用分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸、蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。我们实验室主要是用来测物质的光度以求得物质的浓度或者酶活。基本原理分子的紫外可见吸收光谱是由于分子中的某些基团吸收了紫外可见辐射光后,发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱。
从理论上讲, 吸光度值为最佳值0. 434Abs 时, 分析误差最小。如果被测试样太浓时, 应向靠近0. 434Ab s 的方向稀释。在不同的吸光度上测试, 相对误差和绝对误差都不同。按照目前国际上一般高档紫外可见分光光度计给出的ΔT = ±0. 3% T, 笔者测试的结果见表6-3。
基线平直度 基线平直度是全波段内每个波长上的噪声体现,基线平直度直接影响紫外可见分光光度计光度准确度的灵敏度以及影响检测下限或使用范围,是紫外可见分光光度计中一个十分重要的技术参数。
常数,与对光吸收的灵敏度呈正相关。该公式适用于有色溶液和均匀非散射的吸光物质(如:固、液、气)。在进行含量测定的时候,我们往往选择被测物质的最大吸收波长来作为使用波长,以防止外界干扰。
将灵敏度旋钮调至“1”档(放大倍率最小)。调波长调节器至所需波长。 (3) 开启电源开关,指示灯亮,选择开关置于“T”,调节透光率[100%T]旋钮使数字显示[100.0]左右,预热20min . 根据溶液浓度大小,选择液层厚度合适的吸收池。
灵敏度越高的仪器,表现出的吸光值漂移越大。 事实上,分光光度计的设计原理和工作原理,允许吸光值在一定范围内变化,即仪器有一定的准确度和精确度。如Eppendorf Biophotometer的准确度≤0%(1A)。这样多次测试的结果在均值0%左右之间变动,都是正常的。
但光电比色计***用钨灯光源和滤光片,只适用于可见光谱区和只能 得到一定波长范围的复合光 , 而不是单色光束,还有其他一些局限,使它无论在测量的准确度、灵敏度和应用范围上都不如紫外-可见分光光度计。20 世纪30~60年代,是比色法发展的旺盛时期,此后就逐渐为分光光度法所代替。
1、【】分光光度法的特点是操作简单、灵敏度高、测定仪器成本不高,用范围广。
2、主要是成本便宜,使用比较方便,对于一些特定和大量的指标有着一定的优势。但在环境污染日益严重的今天,随着环境污染物的增加,作用会越来越小,只能作为一个常规方法,仅此而已。不同的监测项目用不同的监测方法测定。但分光光度法可以测定的元素很多。
3、操作容易:分光光度法是比色法的发展,比色法只限于在可见光区,分光光度法则可以扩展到紫外光区和红外光区。测定成分广:分光光度法具有较高的精度,能满足目前环境监测的要求,设备价廉轻便,操作简易。灵敏度高:分光光度法是常用的一种分析方法,灵敏度较高,原则上可测ppm级。
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