肯定要加显色剂-- 邻二氮菲(邻菲罗啉)。在试剂空白实验中加入的试剂种类、试剂数量、反应条件、显色时间等统统与条件试验一致。其目的是以试剂空白为参比溶液,在选定的波长下,测定溶液吸光度。
分取试液00mL于50mL容量瓶中,加入0mL酒石酸溶液、5mL盐酸羟胺溶液、0mL邻菲罗啉溶液、0mL乙酸钠溶液,用去离子水稀释至刻度,摇匀,放置15min,用1cm的比色皿,以试剂空白作参比溶液,在510nm处使用分光光度计测定吸光度,记录实验数据(表4)。
将试样中的铁全部转化成二价铁,再用显色剂显色,则测得的是全铁。若先加入掩蔽剂 将三价铁掩蔽起来,再用显色剂显色,则测得的是亚铁。
在分光光度计上用 l cm 比色皿,以试剂空白为参比溶液,在440~560 nm 间,每隔10 nm测定一次吸光度,以波长为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制吸收曲线,找出最大吸收波长λmax。
实验原理 磺基水杨酸是分光光度法测定铁的有机显色剂之一。磺基水杨酸 (简式为 HR)与Fe可以形成稳定的配合物,因溶液pH的不同,形成配合物的组成也不同。在 pH=9~15 的 NHHO-NHC溶液中,Fe3+与确基水杨酸反应生成三磺基水杨酸铁***配合物。
可见分光光度法测定都要有反应,反应的和程度和溶液反应的时间有一定关系,测定中为了让各测量结果具有好的一致性,减少误差,通常要求试剂的量、顺序和时间要一致。顺序不能颠倒。还原剂是为了把Fe3+还原为Fe2+,缓冲溶液是调节一定的PH值范围,使配位反z应更完全,所以要在显色剂之前加。
1、实验前,没有校正仪器;配制溶液时,出现误差,如铁试样加多了等;测吸光度时,比色皿的粗糙面对准光路,而非光滑面;比色皿光滑而没有擦干净,上面还有水或铁溶液;参比溶液改变等。
2、许多物质的测定都***用分光光度法。在分光光度计中,将不同波长的光连续地照射到一定浓度的样品溶液时,便可得到与不同波长相对应的吸收强度。原理:朗伯一比尔(Lambert - Beer)定律是分光光度法的基本原理。
3、因为含铁的溶液中其它的物质也有吸光度,会影响铁的吸光度的测定,所以要排除这部分溶液的影响,用到参比溶液,就是含铁溶液中的没有待测物的溶液。
4、试样也不能太浓, 吸光度也不能太大, 如果试样的吸光度太大, 因为杂散光的原因, 使分析测试结果严重偏离比耳定律, 可能会使分析误差增大。甚至会产生试样浓度增大时, 吸光度值反而减小等反常现象。
5、又因为吸光度在分光光度计上的表盘读数是按照对数尺度刻分的。那么经过一些列的相关实验已经证实,当吸光度在0.2-0.8的范围内的时候,读取的读数的误差是最小的。我们在进行实验的时候,可以调整标样和待测样的浓度使其吸收正好落在这一范围内。
水中的总铁离子(二价铁和三价铁)可按国标法,用分光光度计来测,所需试剂有二氮杂菲、盐酸(1+1)、盐酸羟胺、乙酸铵缓冲溶液等。由于过程中需要加热,所以耗时比较长,实验之前还需要做标准曲线,要***购标准溶液。
放置10分钟,以不加铁的试剂空白溶液为参比溶液,在分光光度计上,选定波长511nm处分别测定各溶液的吸光度。以铁含量为横坐标,相应的吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。水样中微量铁的测定 准确吸取澄清水样0mL(或适量)置于50 mL容量瓶中,按上述制备标准曲 线的方法配制溶液并测定其吸光度。
在510nm处使用分光光度计测定吸光度,记录实验数据(表4)。实验完毕后,用蒸馏水将比色皿清洗干净,用滤纸或镜头纸吸干水分,放回原处。表4 实验记录 (7)数据处理及结果计算 依据样品的吸光度可以从标准曲线上得到试样溶液的浓度,再根据稀释倍数及取样量计算原试样中铁的含量。
+ 4H+ + 2CI- A=Kbc 过程:吸收曲线测绘:取10ug/mL铁标准溶液5mL于25mL容量瓶加100g/L盐酸羟胺1mL,加1mol/LNaOAc溶液5mL和1g/Lphen2mL放置10min在分光光度计从波长570~430nm每隔10nm测吸光度。显色剂浓度实验。
二氮杂菲分光光度法可以分别测定低铁和高铁,适用于较清洁的水样;原子吸收分光光度法快速且受干扰物质影响较小。水样中铁一般都用总铁量表示。11二氮杂菲分光光度法11应用范围11本法适用于测定生活饮用水及其水源水中总铁的含量。
称取250g乙酸铵(NH4C2H3O2).,若取50ml水样测定水中铁离子含量测定方法水中铁离子含量测定方法铁在深层地下水中呈低价态.1。15乙酸铵缓冲溶液(pH4,溶于150ml纯水中,相对误差为14,暴露于空气的水中,同时消除氰化物、0,有水合物(C12H8N2?.3%.1量取50。
1、铁 的测定常用邻菲罗啉法,其原理为:试样蒸干后残渣用盐酸溶解,然后用盐酸羟胺 将试样中的铁(Ⅲ)还原为铁(Ⅱ)在pH为4~5的条件下,铁(Ⅱ)与邻菲罗啉反应生 成红色络合物,可用分光光度法测定其含量。 2 仪器 分光光度计。
2、查找人胰岛素的基因序列,人工合成之后连接到酵母菌的质粒载体上,质粒上应有标记基因,培养并筛选连接成功的酵母菌,再进行培养,检测其产物是否为胰岛素,选择产物是胰岛素的酵母菌进行培养,收集所产胰岛素,分离纯化,实验验证,临床应用。
3、空气中氯气用大型气泡吸收管***集,在酸性溶液中,氯置换出溴化钾中的溴,溴破坏甲基橙分子结构使褪色;根据褪色程度,于515nm波长处测量吸光度,定量测定。 2 2 仪器 1 大型气泡吸收管。 2 空气***样器,流量0~1L/min。 3 具塞比色管,10ml。 4 分光光度计。
4、可见分光光度计。16 分析步骤11 样品消化11 粮食或水分少的食品:称取00g样品,置于消化装置锥形瓶中,加玻璃珠数粒及80mL硝酸、15mL硫酸,转动锥形瓶,防止局部炭化。装上冷凝管后,小火加热,待开始发泡即停止加热,发泡停止后加热回流2h。
5、均相溶胶颗粒免疫测定法(sol particle immunoassay, SPIA)是利用免疫学反应时金颗粒凝聚导致颜色减退的原理,将纳米金与抗体结合,建立微量凝集试验检测相应的抗原,如间接血凝一样,用肉眼可直接观察到凝集颗粒。已成功地应用于PCG的检测,直接应用分光光度计进行定量分析。
首先你要有相应元素得标准样品,配制至少五个不同浓度,也就是标样1到5,测得五个样相应的吸收度,建立以浓度为横坐标,吸收值为纵坐标的标准曲线,标准曲线要够直。
横坐标是浓度 纵坐标是吸光度对吧?浓度设置不为零那就肯定从X轴出来呗。这个不影响什么。怎么不贴个图?如果空白溶液吸光度不为零那就是Y轴出来呗。这个不用想了。
对于分光光度法,做工作曲线线性很好的A值范围在0.2到0之间,低于0.2或大于0,时,曲线比较平滑,线性不好。当然,这样说是指你测出来的标准样品的吸光度跨度范围大,既有低于0.2,或者还包含高于0的,这样会影响整体的线性相关度。
试样经适当处理后,在与测定标准曲线吸光度的相同条件下测定其吸光度(一般***用插入法测定,即将试样穿***测定标准溶液中间进行测量),根据试样溶液的吸光度,通过标准曲线即可查出试样溶液的含量,再换算成试样的含量(%)。仪器与试剂1.原子吸收分光光度计。2.铁元素空心阴极灯。3.空气压缩机。
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