本篇文章给大家分享紫外分光光度计的检测原理,以及对应的知识点,希望对各位有所帮助。
紫外分光光度计用于检定物质,通过分析物质的吸收光谱来识别和量化样品中的成分。 在分析过程中,将待测物质的吸收光谱与标准物或标准图谱进行对照,以确定物质的种类和浓度。 通过比较最大吸收波长的吸收系数,可以验证实验结果的一致性,确保数据的准确性。
紫外分光光度计基本工作原理和红外光谱仪相似,利用一定频率的紫外--可见光照射被分析的有机物质,引起分子中价电子的跃迁,它将有选择地被吸收。一组吸收随波长而变化的光谱,反映了试样的特征。
基本工作原理:和红外光谱仪相似,利用一定频率的紫外--可见光照射被分析的有机物质,引起分子中价电子的跃迁,它将有选择地被吸收。一组吸收随波长而变化的光谱,反映了试样的特征。
用来测量待测物质对可见光(400~760nm)的吸光度并进行定量分析的仪器,称为可见分光光度计。截止阀 可在600nm测定细菌细胞密度。(2)紫外可见分光光度计 紫外可见光谱仪用来测量待测物质对可见光或紫外光(200~760nm)的吸光度并进行定量分析的仪器。
紫外分光光度计的原理:物质的吸收光谱本质上就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量,相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构,其吸收光能量的情况也就不会相同。
DA是代表什么呢?根据紫外光光度计的原理,是可以用来检测DA含量的;如果能有物质和DA反应,并在紫外光波长范围有吸光能力,则可以测他的含量。当然前提是必须有商品化的标准品来做标准曲线。
1、紫外-可见分光光度法在190~800nm波长范围内测定物质的吸光度,用于鉴别、杂质检查和定量测定。当光穿过被测物质溶液时,物质对光的吸收程度随光的波长不同而变化。因此,通过测定物质在不同波长处的吸光度,并绘制其吸光度与波长的关系图即得被测物质的吸收光谱。
2、紫外的可见光的一些区域可以区别光的波长。而物质的吸光光谱就是将它们自身的原子以及组成它们的分子通过吸收一些波长一定的入射光的能量,从而会出现分子之间以及电子的碰撞和振动,也就是实现了能级之间的跃迁。下面让我们更多的了解一下紫外分光光度计。
3、用于定量时,在最大吸收波长处测量一定浓度样品溶液的吸光度,并与一定浓度的对照溶液的吸光度进行比较或***用吸收系数法求算出样品溶液的浓度。应用范围包括:①定量分析,广泛用于各种物料中微量、超微量和常量的无机和有机物质的测定。
基本原理分子的紫外可见吸收光谱是由于分子中的某些基团吸收了紫外可见辐射光后,发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱。它是带状光谱,反映了分子中某些基团的信息,可以用标准光谱图再结合其它手段进行定性分析。
同时,不同的物质对不同波长的单色光呈现出不同的吸光度值,这一变化特征也就是分光光度法用于物质的定性定量分析的理论基础。
按所吸收光的波长区域不同,分为紫外分光光度法和可见分光光度法,合称为紫外—可见分光光度法。
分光光度计的基本原理是溶液中的物质在光的照射激发下,产生了对光的 吸收效应,物质对光的吸收是具有选择性的。各种不同的物质都具有其各自的 吸收光谱,因此当某单色光通过溶液时,其能量就会被吸收而减弱,光能量减 弱的程度和物质的浓度有一定的比例关系,也即符合于比色原理—一比耳定律。
1、为保持试剂和仪器的稳定性监控,试剂空白需要以蒸馏水为空白,记录真实数据。它具有灵敏度高、操作简便、快速等优点,是生物化学实验中最常用的实验方法。许多物质的测定都***用分光光度法。在分光光度计中,将不同波长的光连续地照射到一定浓度的样品溶液时,便可得到与不同波长相对应的吸收强度。
2、测量的范围不同:(1)紫外分光光度计量程为200nm~600nm间,其中包括部分可见光。(2)可见分光光度计量程为320nm-1100nm,能满足不同物质的测试。所用的灯不同:(1)紫外分光光度计通常用氢灯或氘灯。(2)可见分光光度计通常***用钨灯或卤钨灯。
3、物质吸收波长范围在200~760nm区间的电磁辐射能而产生的分子吸收光谱称为该物质的紫外——可见吸收光谱,利用紫外——可见吸收光谱进行物质的定性、定量分析的方法称为紫外——可见分光光度法。其光谱是由于分子之中价电子的跃进而产生的,因此这种吸收光谱决定于分子中价电子的分布和结合情况。
4、检测器:紫外可见分光光度计一般使用光电管来检测。而原子吸收分光光度计使用的是光电倍增管,分辨力比光电管强。应用:原子吸收分光光度计是属于原子光谱。紫外可见分光光度计属于分子光谱,两者都符合朗伯-比耳定律。
5、用紫外光源测定无色物质的方法,称为紫外分光光度法;用可见光光源测定有色物质的方法,称为可见光光度法。它们与比色法一样,都以Beer-Lambert定律为基础。 上述的紫外光区与可见光区是常用的。但分光光度法的应用光区包括紫外光区,可见光区,红外光区。
6、原理 相同点:吸光光度法和荧光分析法都是分子光谱。
吸收。对乙酰氨基酚具有共轭双键结构,在紫外区有吸收,测定其最大吸收波长257nm处的吸光度可计算含量。其紫外吸收光谱特征可用于原料及部分制剂的含量测定。
分光光度计的基本工作原理是基于物质对光(对光的波长)的吸收具有选择性,不同的物质都有各自的吸收光带。所以,当光色散后的光谱通过某一溶液时,其中某些波长的光线就会被溶液吸收。在一定的波长下,溶液中物质的浓度与光能量减弱的程度有一定的比例关系,即符合比尔定律。
为保持试剂和仪器的稳定性监控,试剂空白需要以蒸馏水为空白,记录真实数据。它具有灵敏度高、操作简便、快速等优点,是生物化学实验中最常用的实验方法。许多物质的测定都***用分光光度法。在分光光度计中,将不同波长的光连续地照射到一定浓度的样品溶液时,便可得到与不同波长相对应的吸收强度。
紫外-可见分光光度法:是根据物质分子对波长为200-760nm这一范围的电磁波的吸收特性所建立起来的一种定性、定量和结构分析方法。操作简单、准确度高、重现性好。波长长(频率小)的光线能量小,波长短(频率大)的光线能量大。分光光度测量是关于物质分子对不同波长和特定波长处的辐射吸收程度的测量。
用紫外光源测定无色物质的方法,称为紫外分光光度法;用可见光光源测定有色物质的方法,称为可见光光度法。它们与比色法一样,都以Beer-Lambert定律为基础。 上述的紫外光区与可见光区是常用的。但分光光度法的应用光区包括紫外光区,可见光区,红外光区。
紫外可见分光光度法是利用物质吸收光的特性来测定样品中所含物质浓度的方法。而菁茶中总黄酮在紫外光区域(200-400nm)有吸收峰,可用紫外光谱仪检测其吸收强度。常见的总黄酮成分如槲皮素、芦丁、异鼠李素等在350-370nm处有吸收峰,可以根据这些吸收峰的特点进行测定。
高利通光谱仪用光电检测器将谱线的辐射能转换成电能。检测输出的信号,经加工处理,在读出装置上显示出来。然后根据相应的标准物质制作的分析曲线,得出分析试样中待测元素的含量。
它通过电子跃迁产生的特征光谱,揭示化合物的结构和性质,广泛应用于化学、材料科学等多个领域。该方法的核心在于理解光谱的组成,包括紫外、可见、红外和微波,以及电子跃迁的类型和辐射吸收定律(朗伯-比耳定律)的作用。
紫外的可见光的一些区域可以区别光的波长。而物质的吸光光谱就是将它们自身的原子以及组成它们的分子通过吸收一些波长一定的入射光的能量,从而会出现分子之间以及电子的碰撞和振动,也就是实现了能级之间的跃迁。下面让我们更多的了解一下紫外分光光度计。
测量的范围不同:(1)紫外分光光度计量程为200nm~600nm间,其中包括部分可见光。(2)可见分光光度计量程为320nm-1100nm,能满足不同物质的测试。所用的灯不同:(1)紫外分光光度计通常用氢灯或氘灯。(2)可见分光光度计通常***用钨灯或卤钨灯。
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