紫外—可见分光光度计类型很多,但归纳为三种类型,即单光束分光光度计、双光束分光光度计和双波长分光光度计。以下仅介绍宝石测试中常用的双光束分光光度计(见图2-2-27)。经单色器分光后经反射镜分解为强度相等的两束光,一束通过参比池,一束通过样品池。
物质的紫外-可见光吸收光谱产生的原因是分子内的电子能级间的跃迁所引起的。紫外可见光光度计原理:分子的紫外可见吸收光谱是由于分子中的某些基团吸收了紫外可见辐射光后,发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱。紫外可见分光光度计是由光源、单色器、吸收池、检测器和信号处理器等部件组成。
【答案】:紫外-可见分光光度计的基本组成可分为光源、单色器、吸收池、检测器和显示系统。
紫外-可见分光光度法定性和定量分析的依据是光谱吸收定律和朗伯-比尔定律。首先,光谱吸收定律是指物质在某一波长下的吸光度与其在特定波长下的浓度成正比。这意味着当物质被紫外-可见光照射时,它会吸收特定波长的光,其吸收程度与该物质的浓度成正比。
在实际操作中,可以通过扫描样品的紫外可见光谱图来确定合适的波长。通过观察光谱图可以找到一个既能使被测物质有较大吸收,又能尽量避免干扰的波长。此外,还可以根据实验目的、样品性质以及文献资料等信息来指导选择合适的入射光波长。
1、实验紫外分光光度法测定蛋白质含量 【实验目的】掌握紫外分光光度法测定蛋白质含量的原理和方法 掌握紫外光分光光度计使用 【实验原理】蛋白质中含有酪氨酸、色氨酸等氨基酸残基,在紫外光280nm波长处有最大吸收峰,故可用280nm的光吸收值(即光密度的大小)来测定蛋白质的含量。
2、加入还原剂,常用的是氢氧化钠(NaOH)和碘化钠(NaI),使硝酸盐还原为氨态氮。在加入还原剂的同时,将锥形瓶倒置数次,使水样和还原剂充分混合。然后静置5-10分钟。再次用紫外分光光度计测定氨态氮的吸光度(常在630nm处测量),根据标准曲线计算出水样中氨态氮的含量。
3、若样品中含有嘌呤、嘧啶及核酸等吸收紫外光的物质,会出现较大的干扰。虽然可以通过校正表的计算减少核酸的干扰,但测定的结果仍存在一定的误差。【实验器材】紫外分光光度计、试管和试管架、微量移液器和枪头。【药品试剂】1.浓度为1 mg/ml的标准蛋白溶液。
4、原标准中只对制剂中的黄连小檗碱成分进行了含量测定,而白芍养血敛阴,缓急和里,为方中要药,目前认为芍药苷为白芍的.有效成分,因此,本研究对制剂中的芍药苷进行了含量测定,为完善泻痢消胶囊质量控制提供一定参考。
5、泻痢消胶囊中芍药苷含量的测定***用高效液相色谱法(HPLC)。本研究旨在建立一种准确测定泻痢消胶囊中芍药苷含量的方法,以完善该药品的质量控制标准。以下是测定过程和结果的详细描述。
6、目的:建立高效液相色谱法分离和测定黄松油中龙血素B。2 在此检测条件下山柰酚与其它组分的色谱峰得到基线分离。2 结论:***用气相色谱法测定鲜竹沥中愈创木酚含量的方法可行。
将分析样品和标准样品以相同浓度配制在同一溶剂中,在同一条件下分别测定紫外可见吸收光谱。若两者是同一物质,则两者的光谱图应完全一致。如果没有标样,也可以和现成的标 准谱图对照进行比较。这种方法要求仪器准确,精密度高,且测定条件要相同。
用于定量时,在最大吸收波长处测量一定浓度样品溶液的吸光度,并与一定浓度的对照溶液的吸光度进行比较或***用吸收系数法求算出样品溶液的浓度。应用范围包括:①定量分析,广泛用于各种物料中微量、超微量和常量的无机和有机物质的测定。
用来测量待测物质对可见光(400~760nm)的吸光度并进行定量分析的仪器,称为可见分光光度计。可在600nm测定细菌细胞密度。紫外可见光谱仪用来测量待测物质对可见光或紫外光(200~760nm)的吸光度并进行定量分析的仪器。可以测定核酸和蛋白的浓度,涡街流量计也可以测定细菌细胞密度。
应用分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸、蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。我们实验室主要是用来测物质的光度以求得物质的浓度或者酶活。基本原理分子的紫外可见吸收光谱是由于分子中的某些基团吸收了紫外可见辐射光后,发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱。
紫外可见分光光度法 是根据物质分子对波长为200~760nm的电磁波的吸收特性所建立起来的一种定性、定量和结构分析方法。操作简单、准确度高、重现性好。波长长的光线能量小,波长短的线能量大。分光光度测量是关于物质分子对不同波长和特定波长处的辐射吸收程度的测量。
紫外分光光度计的主要作用是测量物质在紫外光区域的吸收光谱,从而对该物质进行定性分析和定量分析。紫外分光光度计是一种常用于化学、生物、医药、环保等领域的分析仪器。其工作原理是基于物质对紫外光的吸收特性。当紫外光照射到物质上时,物质会吸收一部分紫外光,而其余部分则透射或反射。
常用的光电转换元件有光电管、光电倍增管及光二极管阵列检测器。分光光度计的分类方法有多种:按光路系统可分为单光束和双光束分光光度计;按测量方式可分为单波长和双波长分光光度计;按绘制光谱图的检测方式分为分光扫描检测与二极管阵列全谱检测。
紫外——可见分光光度计用于定量分析的基本方法是:用选定波长的单色光照射被测物质的溶液,测量它的吸光度,再根据吸光度计算被测组分的含量。测量的理论依据是“光吸收定律”,即朗伯——比耳定律,当一适当波长的单色光照射吸光物质的溶液时,其吸光度与吸光物质浓度和透光液层厚度的乘积成正比。
个人认为你所说的分光光度计应该指的是紫外可见分光光度计,简称UV-Vis。其测定原理是光吸收定律,又称为Lamber-Beer定律,A=εCL,当光程L一定,摩尔吸光系数一定,则溶液的浓度与吸光度成比。UV-Vis的光源有两种,一种是钨灯,一种是氘灯,分别对应不同的测量波长区域。
【答案】:物质对不同颜色的光能吸收是有选择性的,特定的物质主要吸收一定波长的光,物质吸收了高能量的光以后,就发生能级跃迁产生吸收光谱,该法的定量依据:Beer-Lamber即朗伯比耳定律:A=ECL。
按所吸收光的波长区域不同,分为紫外分光光度法和可见分光光度法,合称为紫外—可见分光光度法。
共轭效应,是电子云密度平均化,吸收峰→低频 空间效应,空间位阻影响共轭,吸收峰→高频 氢键效应,有分子内氢键和分子间氢键,形成氢键后使H原子周围的力场发生变化,改变了X-H的键力常数,吸收峰移向低频。分子间氢键可以通过改变溶液浓度的方法来测定。
同时,不同的物质对不同波长的单色光呈现出不同的吸光度值,这一变化特征也就是分光光度法用于物质的定性定量分析的理论基础。
紫外 - 可见分光光度法是根据物质分子对波长为 200~760nm 这一范围的电磁波的吸收特性所建立的光谱分析方法。《中国药典》 (2005 年版 ) 有 10 种药材用该法进行药材的有效性评价。其主要特点为:灵敏度高,可达 10 -4 g/ml ~10 -7 g/ml ;准确度高,相对误差为 2 % ~5 %。
紫外可见分光光度法原理如下:紫外可见分光光度计基本工作原理和红外光谱仪相似,利用一定频率的紫外可见光照射被分析的有机物质,引起分子中价电子的跃迁,它将有选择地被吸收。一组吸收随波长而变化的光谱,反映了试样的特征。
1、紫外-可见分光光度法定性和定量分析的依据是光谱吸收定律和朗伯-比尔定律。首先,光谱吸收定律是指物质在某一波长下的吸光度与其在特定波长下的浓度成正比。这意味着当物质被紫外-可见光照射时,它会吸收特定波长的光,其吸收程度与该物质的浓度成正比。
2、定性分析的依据:紫外光波长具有一定的范围,不同的物质最大吸收波长不一样,比如甲物质在紫外的a和b波长处有吸收现象,而且在a处达到最大吸收,则甲物质的紫外最大吸收波长是a。不同的物质的这种波长不一样。2,定量分析依据:根据朗伯-比尔定律,物质浓度和吸收波长的强度成正比关系。
3、紫外——可见分光光度计用于定量分析的基本方法是:用选定波长的单色光照射被测物质的溶液,测量它的吸光度,再根据吸光度计算被测组分的含量。测量的理论依据是“光吸收定律”,即朗伯——比耳定律,当一适当波长的单色光照射吸光物质的溶液时,其吸光度与吸光物质浓度和透光液层厚度的乘积成正比。
4、A为吸收度;T为透光率;E为吸收系数,***用的表示方法是(E1%1cm),其物理意义为当溶液浓度为1%(g/ml),液层厚度为1cm时的吸收度数值;C为100ml溶液中所含被测物质的重量(按干燥品或无水物计算),g;L为液层厚度,cm。
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