文章阐述了关于紫外可见分光光度计的工作原理,以及的信息,欢迎批评指正。
1、基本原理分子的紫外可见吸收光谱是由于分子中的某些基团吸收了紫外可见辐射光后,发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱。它是带状光谱,反映了分子中某些基团的信息,可以用标准光谱图再结合其它手段进行定性分析。
2、同时,不同的物质对不同波长的单色光呈现出不同的吸光度值,这一变化特征也就是分光光度法用于物质的定性定量分析的理论基础。
3、按所吸收光的波长区域不同,分为紫外分光光度法和可见分光光度法,合称为紫外—可见分光光度法。
4、分光光度计的基本原理是溶液中的物质在光的照射激发下,产生了对光的 吸收效应,物质对光的吸收是具有选择性的。各种不同的物质都具有其各自的 吸收光谱,因此当某单色光通过溶液时,其能量就会被吸收而减弱,光能量减 弱的程度和物质的浓度有一定的比例关系,也即符合于比色原理—一比耳定律。
两者的原理不同:紫外分光光度计的原理:物质的吸收光谱本质上就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量,相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构,其吸收光能量的情况也就不会相同。
原子吸收分光光度计与紫外可见分光光度计的区别 原理:原子吸收观察的是构成物质的元素(原子)中的电子在原子轨道中的跃迁,属于原子吸收。紫外可见光吸收观察的是构成物质的分子中的电子在分子轨道中的跃迁,属于分子吸收。能量 两者有所同,又有所不同。
紫外分光光度计原理是利用一定频率的紫外可见光照射被分析的有机物质。引起分子中价电子的跃迁,它将有选择地被吸收。物质的吸收光谱本质上就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量,相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。
分光光度计的主要部件 光源:发出所需波长范围内的连续光谱,有足够的光强度,稳定。可见光区:钨灯,碘钨灯(320-2500nm),紫外区:氢灯,氛灯(180-375nm)氩灯:紫外、可见光区均可用作光源。单色器:将光源发出的连续光谱分解为单色光的装置。
在紫外-可见分光光度计中:单色器不仅用于选择特定波长的光,还用于扫描一系列波长,以生成样品的完整吸收光谱。这使得研究人员能够确定分子的结构、浓度以及可能的相互作用。
仪器 相同点:它们都有光源、单色器、液槽、检测器和信号显示器五部分组成。不同点:荧光光度计***用垂直的计量方式,在与激发光垂直的方向测量荧光以消除透射光的影响。
用紫外光源测定无色物质的方法,称为紫外分光光度法;用可见光光源测定有色物质的方法,称为可见光光度法。它们与比色法一样,都以Beer-Lambert定律为基础。
紫外-可见分光光度计由5个部件组成:①辐射源。必须具有稳定的、有足够输出功率的、能提供仪器使用波段的连续光谱,如钨灯、卤钨灯(波长范围350~2500纳米),氘灯或氢灯(180~460纳米),或可调谐染料激光光源等。②单色器[1] 。
两者的应用不同:紫外分光光度计的应用:将分析样品和标准样品以相同浓度配制在同一溶剂中,在同一条件下分别测定紫外可见吸收光谱。若两者是同一物质,则两者的光谱图应完全一致。如果没有标样,也可以和现成的标 准谱图对照进行比较。这种方法要求仪器准确,精密度高,且测定条件要相同。
可见则石英棱镜或玻璃棱镜均可使用,而光栅则二者均可使用,这主要是由于玻璃能吸收紫外光的缘故.从吸收池来看,紫外只能使用石英吸收池,而可见则玻璃、石英均可使用,原因同上。
定量分析依据:根据朗伯-比尔定律,物质浓度和吸收波长的强度成正比关系。紫外-可见分光光度法是在190~800nm波长范围内测定物质的吸光度,用于鉴别、杂质检查和定量测定的方法。当光穿过被测物质溶液时,物质对光的吸收程度随光的波长不同而变化。
首先在测定波长范围有所不同:紫外一般用氢灯,测定波长范围180~350nm,可见一般用钨灯,测定波长范围320~1000nm。所谓紫外可见分光光度计也就是说这个仪器可以更换光源,能够测定吸收峰在紫外和可见光部分的化合物。发现吸光度超过2,便不再显示,是正常现象。
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