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光度计测量浓度

文章阐述了关于质量浓度光度计模块，以及光度计测量浓度的信息，欢迎批评指正。

简述信息一览：

1、分光计，是一种测量角度的精密仪器。其基本原理是，让光线通过狭缝和聚焦透镜形成一束平行光线，经过光学元件的反射或折射后进入望远镜物镜并成像在望远镜的焦平面上，通过目镜进行观察和测量各种光线的偏转角度，从而得到光学参量例如折射率、波长、色散率、衍射角等。

2、分光光度计是将成分复杂的光，分解为光谱线的科学仪器。测量范围一般包括波长范围为380~780 nm的可见光区和波长范围为200～380 nm的紫外光区。不同的光源都有其特有的发射光谱，因此可***用不同的发光体作为仪器的光源。

（图片来源网络，侵删）

3、分光光度计通常由哪五部分组成？各部分功能是什么？分光光度计通常由光源、单色器、样品室、检测器、和显示系统等五部分组成。

4、我觉得主要的两点区别是：1）荧光分光光度计有两个单色器，而紫外只有一个单色器 2）荧光分光光度计的光源和检测器是成直角分布的，而紫外是成一条直线的。

5、原子化器。根据相关资料显示，分光光度计的结构包括光源、分光系统、检测器。分光光度计又称光谱仪（spectrometer），是将成分复杂的光，分解为光谱线的科学仪器。

（图片来源网络，侵删）

邻菲罗啉分光光度法测铁使用的是510nm的波长。在不清楚分析波长的情况下，需要对样品进行光谱扫描，找最大吸收峰来确定分析使用的波长。

用分光光度法测定试样中的微量铁，可选用显色剂邻二氮菲（又称邻菲罗啉），邻二氮菲分光光度法是化工产品中测定微量铁的通用方法。邻二氮菲，即1，10-邻二氮杂菲，1，10-Phenanthroline monohydrate.也称邻菲罗啉、邻菲啰啉、邻菲咯啉，是一种常用的氧化还原指示剂。

将试样中的铁全部转化成二价铁，再用显色剂显色，则测得的是全铁。若先加入掩蔽剂将三价铁掩蔽起来，再用显色剂显色，则测得的是亚铁。

1、检查样品架是否在正确的槽位上，光是否全部照在比色皿上。方法是把波长设定到550nm左右，这时是比较明亮的黄绿色光，在样品室内用个小纸片挡下就能看到光斑。这个方法也能检测可见区的光源是否正常，滤光盘及波长驱动是否正常。3 空白样品：样品室不放任何东西对空气调零，看是否稳定。

2、而分光光度法则是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度，对该物质进行定性和定量分析。常用的波长范围为：（1）200～400nm的紫外光区，（2）400～760nm的可见光区，（3）5～25μm（按波数计为4000cm-1～400cm-1）的红外光区。

3、邻菲罗啉分光光度法测铁使用的是510nm的波长。在不清楚分析波长的情况下，需要对样品进行光谱扫描，找最大吸收峰来确定分析使用的波长。

4、吸光度比空白大的为正比空白小的为负，所以你是负值很正常如果你想测样品浓度必须还要做一组标准系列（就是不同浓度的标准液）把你测样品的浓度包含在你这标准系列浓度范围之内，做出标准曲线就可以计算了。

1、UV-240紫外分光光度计开机预热10min. 用重蒸水洗涤比色皿，吸水纸吸干，加入TE缓冲液后，放入样品室的S池架上，关上盖板。设定狭缝后校零。将标准样品和待测样品适当稀释（DNA5μl或RNA4μl用TE缓冲液稀释至1000μl）后，记录编号和稀释度。

2、一般用微量分光光度计比较快速简便，DNA浓度会直接在软件上显示，A260 / A280的比值用于评估样品的纯度，纯净的样品比值大于8，低于0。较纯净的核酸A260/A230的比值大于0。

3、将待测DNA溶液作适当稀释，选用光程为0.5cm的石英比色杯，在紫外分光光度计上测定OD260和OD280的值，按以下公式计算DNA浓度。

4、除了核酸浓度，分光光度计同时显示几个非常重要的比值表示样品的纯度，如A260/A280的比值，用于评估样品的纯度，因为蛋白的吸收峰是280nm。纯净的样品，比值大于8（DNA）或者0（RNA）。如果比值低于8 或者0，表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。

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