光度计测定条件有哪些

本篇文章给大家分享光度计测定条件，以及光度计测定条件有哪些对应的知识点，希望对各位有所帮助。

简述信息一览：

• 1、药物分析学分光光度法用于含量测定的验证有哪些要求
• 2、分光光度法测定铁的实验条件
• 3、为什么要对光度法测定的条件进行选择?
• 4、吸光光度法测量条件
• 5、光度法对物质有什么样的要求呢?

药物分析学分光光度法用于含量测定的验证有哪些要求

紫外--可见分光光度法：是根据物质分子对波长为200-760nm这一范围的电磁波的吸收特性所建立起来的一种定性、定量和结构分析方法。操作简单、准确度高、重现性好。波长长（频率小）的光线能量小，波长短（频率大）的光线能量大。分光光度测量是关于物质分子对不同波长和特定波长处的辐射吸收程度的测量。

根据查询国标准物质网得知，单波长分光光度法测定含量时对测试溶液和波长应该具有吸光性且具有一定范围。进样一定要准确，测定的波长一定要选择所测主分的最大吸收波长。相应波长范围内不能吸收的不能用该方法测量。

．定量限 主峰与噪音峰信号的强度比应不得小于10。另外，配制6份最低定量限浓度的溶液，所测6份溶液主峰的保留时间的相对标准差应不大于0%。7．耐用性 分别考察流动相比例变化±5%、流动相pH值变化±0.柱温变化±5℃、流速相对值变化±20%时，仪器色谱行为的变化，每个条件下各测试两次。

分光光度法测定铁的实验条件

1、有显色反应的条件和测量吸光度的条件。显色反应的条件包括显色剂的用量、介质的酸度、显色时温度、显色时间及干扰物质的消除方法等。显色剂的用量应控制在规定范围内，保证反应的灵敏度和可重复性。介质的酸度对显色反应有很大影响，应根据具体情况选择适当的酸碱度。

2、测定时，要控制PH=5左右较好，弱酸度较高，反应速度较慢，酸度较低，会使二价铁离子水解，影响显色。项目编号PlanNameinChinese20102215-T-610。中文项目名称PlanNameinChinese镁及镁合金化学分析方法，铁含量的测定邻二氮杂菲分光光度法。

3、原理 在pH=9～15时，三价铁离子能与磺基水杨酸形成比聚磷酸铁络合物更为稳定的***络离子，以分光光度法测定铁离子含量。仪器与试剂 （1）磺基水杨酸：100g/L；（2）氨水：1＋1；（3）浓硝酸；（4）分光光度计。

4、了解邻二氮菲测定铁的基本原理及基本条件，学习显色溶液的制备操作技术；掌握吸收曲线的测绘和测量波长的选择；掌握标准曲线定量的实验技术；了解721型分光光度计的使用方法。 基本原理 邻二氮菲（又称邻菲罗啉）是测定微量铁的一种较好的显色剂。

为什么要对光度法测定的条件进行选择?

选择狭缝宽度的方法是测量吸光度随狭缝宽度的变化，狭缝的宽度在一定范围内，吸光度是不变的，当狭缝宽度增大到某一程度时，吸光度开始减小，因此在不减小吸光度时的最大狭缝宽度，即是所要选取的合适的狭缝宽度。

显色反应受到溶液的酸度、显色剂的用量、有色溶液的稳定性等因素的影响。

【1】选取酸度（PH =5 - 6），是邻二氮菲吸光光度法测定微量铁实验的必要条件（才能生成稳定的邻二氮菲亚铁红色络合物）；【2】显色剂用量要过量，灵敏度才高、有色溶液的稳定性才好。 所以以上两点，作为条件实验的项目。

以确保测量的准确性和可重复性。消除背景干扰：任何可能影响测量结果的背景干扰，如溶剂吸光或杂质的存在，应被适当考虑和消除。遵循以上要求可以提高紫外可见光光度法测量的准确性和可靠性，确保得到可信的分析结果。但具体的实验条件和操作步骤还需要参考具体的仪器说明和方法标准。

【定义】在分光光度法的显色反应影响中，其影响灵敏度的相关因素（包括显色温度、显色时间、显色剂用量、溶液酸度等）的条件选择实验，即为基本条件试验。【意义】基本条件试验是为奠定分光光光度法的实验条件，所必须的实验工作，不可或缺。

吸光光度法测量条件

1、原子吸收分光光度法特点 选择性高，干扰少。共存元素对待测元素干扰少，一般不需分离共存元素。灵敏度高。火焰原子化法：10-9g/ml；石墨炉：10-13g/ml 测定的范围广。测定70多种元素。操作简便、分析速度快。准确度高。火焰法误差1 ，石墨炉法3%-5％。

2、其次，朗伯-比尔定律是指在一定条件下，物质的吸光度与其浓度和液层厚度成正比。这意味着当物质的浓度和液层厚度一定时，其吸光度是恒定的。因此，在紫外-可见分光光度法中，可以通过测量样品在不同波长下的吸光度，并根据朗伯-比尔定律计算出样品的浓度。

3、比尔-朗伯定律（Beer–Lambert law），又称比尔定律或比耳定律（Beer’s law）、朗伯-比尔定律、布格-朗伯-比尔定律（Bouguer–Lambert–Beer law），是光吸收的基本定律，适用于所有的电磁辐射和所有的吸光物质，包括气体、固体、液体、分子、原子和离子。

4、原理不同：吸光光度法：是借助分光光度计测定溶液的吸光度，根据朗伯一比耳定律确定物质溶液的浓度。吸光光度法是比较有色溶液对某一波长光的吸收情况。分光光度法：是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度，对该物质进行定性和定量分析的方法。

光度法对物质有什么样的要求呢?

1、吸光光度法测定对显色反应有何要求：选择性要好、灵敏度要高、对比度要大、有色化合物要稳定、组成要恒定，显色反应的条件要易于控制。考虑显色反应的条件为：显色剂的用量；溶液的酸度；时间和温度；有机溶剂和表面活性剂；共存离子的干扰及消除。

2、入射光= 反射光 + 分散光 + 吸收光 + 透过光。如果我们用蒸馏水（或组成此溶液的溶剂）作为空白去校正反射，分散等因素造成的入射光的损失则：入射光 = 吸收光 十 透过光。于是，吸光光度法的根本是测定待测液及标液各自对特定波长的单色光的吸收程度，再根据朗伯一比耳定律进行计算。

3、例如甲醇、乙醇的截止使用波长为205nm。另外，当溶剂不纯时，也可能增加干扰吸收。因此，在测定供试品前，应先检查所用的溶剂在供试品所用的波长附近是否符合要求，即将溶剂置1cm石英吸收池中，以空气为空白（即空白光路中不置任何物质）测定其吸光度。

4、如何选择分光光度法测定中测量条件 ⒈确定适宜的条件的原因：在可见光分光光度法的测定中，通常是将被测物与显色剂反应，使之生成有色物质，然后测其吸光度，进而求得被测物质的含量。因此，显色条件的完全程度和吸光度的测量条件都会影响到测量结果的准确性。

5、单波长分光光度法测定含量时对测试溶液和波长应该具有吸光性且具有一定范围。进样一定要准确，测定的波长一定要选择所测主分的最大吸收波长。相应波长范围内不能吸收的不能用该方法测量。不同成分最大吸光波长不同，以便减小误差，被测物质浓度要有一定范围，防止在分光光度计无法测量。

关于光度计测定条件，以及光度计测定条件有哪些的相关信息分享结束，感谢你的耐心阅读，希望对你有所帮助。