今天给大家分享分光光度计波长的选定,其中也会对分光光度法测量波长选择的依据是什么的内容是什么进行解释。
因为过硫酸钾将水样中的氨氮、亚硝酸盐氮及大部分有机氮化合物氧化为硝酸盐。硝酸根离子在220nm波长处有吸收,而溶解的有机物在此波长也有吸收,干扰测定。而硝酸根离子在275nm处没有吸收。所以在275nm处也测定吸光度,用来校正硝酸盐氮值。
选择检测波长是紫外可见分光光度法测定组分含量的一个重要步骤,一般应根据被检测物质的特性和吸收峰的位置来选择。
紫外可见分光光度法合适的检测波长范围是200~800nm。紫外可见光分光光度计工作原理与红外光谱、拉曼光谱的工作原理近似,***用一定频率的紫外可见光照射所需检测的物质,引起物质中电子跃迁,从而表现出随着吸收波长变化而引起的光谱变化,记录光谱变化形成分析数据。
根据显色剂对各个波长光的吸收情况选取,一般取吸收值最大的波长作为分析波长。
测定波长选择是否正确对吸光光度分析的灵敏度、准确度和选择性均有影响,正确选择测定波长的原则是 “吸收最大,干扰最小”,以提高测定的准确性。 在本实验条件下,由于无干扰元素共存,原则上应选用 A —λ曲线中吸光度最大处的波长进行测定。
入射光波长选择的原则是便于观察和实验效果。观察微小粒子的衍射,可以选择波长较长的光,因为长波光的衍射现象比较明显。观察细小条纹时,应选择波长在一定范围内的光,以保证光程差适合条纹间距的测量。根据光的干涉条件,光波的波长越大,光程差越大,干涉条纹间距也越大。
入射光波长选择的原则是吸收最大干扰最小 波长(wavelength),是指波在一个振动周期内传播的距离。也就是沿着波的传播方向,相邻两个振动位相相差2π的点之间的距离。波长λ等于波速u和周期T的乘积,即λ=uT。同一频率的波在不同介质中以不同速度传播,所以波长也不同。
【答案】:B 用分光光度法定量分析时,所选择的波长应该是被测物质在该光区有特征吸收的波长,因此吸收曲线(吸收光谱)是定量分析时选择入射光波长的重要依据。
紫外可见分光光度法合适的检测波长范围是200~800nm。紫外可见光分光光度计工作原理与红外光谱、拉曼光谱的工作原理近似,***用一定频率的紫外可见光照射所需检测的物质,引起物质中电子跃迁,从而表现出随着吸收波长变化而引起的光谱变化,记录光谱变化形成分析数据。
紫外-可见分光光度法的使用方法 (1) 波长 由于环境因素对机械部分的影响,仪器的波长经常会略有变动,因此除应定期对所用的仪器进行全面校正检定外,还应于测定前校正测定波长。
校正和标准曲线:校正曲线:通过一系列标准溶液建立校正曲线,确定目标分析物在两个波长处的吸光度与浓度之间的关系。这个过程可以更精确地消除干扰带来的影响。实施双波长分光光度法的步骤:波长选择:选择适当的主波长和参比波长,确保它们分别对目标分析物和共存组分具有较大的吸光度差异。
双波长分光光度法的原理基于比尔定律(Beer-Lambert Law)。比尔定律是光学领域的基本定律之一,它描述了物质溶液中吸光度与物质浓度之间的关系。根据比尔定律,物质溶液的吸光度(A)与溶液中物质的浓度(C)和光程(l)满足以下关系式:A=εCl。
测量吸光度,计算浓度。测量吸光度:使用分光光度计测量样品溶液在工作波长和参比波长处的吸光度,工作波长下的吸光度主要受目标化合物的浓度影响,而参比波长下的吸光度不受目标化合物浓度的影响。
磺胺嘧啶片、磺胺二甲嘧啶片的片剂要检查溶出度,用紫外分光光度法。复方磺胺甲恶唑片的含量测定:双波长分光光度法。关键是选择测定波长(λ2)和参比波长(λ1)。波长选择的原则是:干扰组分在λ2和λ1处的吸收度应相等。
双波长分光光度法消除共存组分干扰:通过测定一种组分的等吸收点,再计算二度吸光值的差值,从而消除一种组分对另一种组分的干扰。
双波长分光光度计用两种不同波长(λ1和λ2)的单色光交替照射试液(不需要使用参比溶液),并被光电倍增管交替接收,测得的是扣除了背景干扰的吸光度之差△A。
A = ECL 式 (3-1)式中 A 为吸收度 ; E 为吸收系数,即单位浓度、单位液层厚度的吸收度数值; C 为溶液浓度; L 为液层厚度。紫外 - 可见分光光度法是根据物质分子对波长为 200~760nm 这一范围的电磁波的吸收特性所建立的光谱分析方法。
首先在测定波长范围有所不同:紫外一般用氢灯,测定波长范围180~350nm,可见一般用钨灯,测定波长范围320~1000nm。所谓紫外可见分光光度计也就是说这个仪器可以更换光源,能够测定吸收峰在紫外和可见光部分的化合物。发现吸光度超过2,便不再显示,是正常现象。
波长在400~750 nm范围的称为可见光谱。常用的分光光度计一般包括紫外及可见两部分,波长在200~800 nm(或200~1000 nm)。测量意义 准确测定有机化合物的分子结构,对从分子水平去认识物质世界,推动近代有机化学的发展是十分重要的。***用现代仪器分析方法,可以快速、准确地测定有机化合物的分子结构。
UV-2600A紫外可见分光光度计 技术参数 光谱带宽:8nm(4nm可选)(UV-2600),2nm(UV-2600A) 光度精度:±0.002Abs(0-0.5Abs)±0.003(0.5-1Abs)0.2%T 光度重复性:±0.0008Abs(0-0.5Abs);±0.0015(0.5-0Abs)±0.15%T 波长范围:320-1100nm。
测量的范围不同:(1)紫外分光光度计量程为200nm~600nm间,其中包括部分可见光。(2)可见分光光度计量程为320nm-1100nm,能满足不同物质的测试。所用的灯不同:(1)紫外分光光度计通常用氢灯或氘灯。(2)可见分光光度计通常***用钨灯或卤钨灯。
该法设备简易,但操作复杂,误差较大。后者的原理是H2O2为有电活性物质,但经PHD催化后其产物为无电活性物质,用铂电极来测量PHD催化前后电流变化引起电压的变化,测出PHD活性大小。还可应用分光光度法、瓦氏呼吸仪检压法、硫酸高铈法等。
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