今天给大家分享真光光度计,其中也会对真光实验的内容是什么进行解释。
1、原理:分光光度计的基本原理是溶液中的物质在光的照射激发下,产生了对光吸收的效应,物质对光的吸收是具有选择性的,各种不同的物质都具有其各自的吸收光谱,因此当某单色光通过溶液时,其能量就会被吸收而减弱,光能量减弱的程度和物质的浓度有一定的比例关系,也即符合于比色原理---比耳定律。
2、第二,准备标准溶液。标准溶液的制备应该严格按照实验要求,确保标准溶液的浓度准确无误。第三,进行测量。在测量时,应该严格按照实验要求进行,避免误差的产生。同时,为了减小误差,我们应该尽可能多地测量每个标准样品的数据点。第四,绘制标准曲线。
3、计算样品浓度:根据实验中绘制的标准曲线,依据检测到的样品吸光度,通过插值或外推计算出样品的浓度值。在制作标准曲线时,需要用到吸光光度计,通过吸收法对标准物质和样品进行光谱分析,测量吸光度和浓度之间的关系。
在分光光度法测定中,尽可能选择最大吸收波长为测量波长是为了更好地鉴别物质的存在或物质的含量。物质与光作用,具有选择吸收的特性。有色物质的颜色是该物质与光作用产生的。即有色溶液所呈现的颜色是由于溶液中的物质对光的选择性吸收所致。
分光光度计的原理是:基于物质对光(对光的波长)的吸收具有选择性,不同的物质都有各自的吸收光带。分光光度计,又称光谱仪,是将成分复杂的光,分解为光谱线的科学仪器。测量范围一般包括波长范围为380~780 nm的可见光区和波长范围为200~380 nm的紫外光区。
例如,在测量紫外吸收时,波长选择在250~400nm范围内,在测量可见光吸收时,波长选择在400~700nm范围内,选择恰当的波长可以有效提高分光光度计的精度和准确性。分光光度计通过分光器将白光分解成不同波长的光,再对样品溶液所吸收的特定波长处的光强进行检测计算,从而确定样品中物质的浓度。
吸收光谱的产生:当物质分子吸收光能后,会从基态跃迁到激发态,然后逐渐回到基态。在这个过程中,物质会以辐射的形式释放出多余的能量,从而回到基态。这些辐射的波长和强度与物质的组成和浓度有关,因此可以用来进行定性和定量分析。
你可以用相对稳定的标准溶液测一下试试,如果还是不稳定,那就说明是仪器本身有问题,如果重现性好,那就是你的实验方法有问题了。既然是新购的仪器,何不请厂家来看看,让他们帮你鉴定一下,如果仪器确有问题,还可以请厂家调换一台。
这个波长其实只是针对浊度,而分光光度计在600nm处对浊度的反应比较灵敏。
紫外在测定前用空白溶剂调0,测定过程中不允许调零,直到测定结束。中间调零会引入两次调零之间的系统误差。尽管提问者已经做出了选择,我真的不希望你误导后来者。
你应该是用分光光度计做DNA,蛋白质的测量的,测量完260测280的时候是需要调零的,因为在做溶液的时候。在每个波长的吸收值是不一样的,只能通过调零来进行校正,现在的很多厂家的紫外可见分光光度计都带有DNA,蛋白质测量功能,自己测量再算很麻烦 ,建议换台新的了。
预热后,按(3)连续几次调整“0”和“100%”,紫外分光光度计即可进行测定工作。吸光度的测量:按(3)调整仪器的“00.0”和“100%”后,将选择开关置于“A”,调节吸光度调零旋钮,使数字显示为“000” ,然后将被测样品移入光路,显示值即为被测样品的吸光度值。
每次都调零当然最好,但是实际操作很多时候不需要那么严格,一般来说,数据不正常的时候,你再调零做做看嘛。
如果大幅度改变测试波长时,在调整“00.0”和“100”后稍等片刻(因光能量变化急剧,光电管受光后响应缓慢,需一段光响应平衡时间),当稳定后,重新调整“00.0”和“100”即可工作。(4) 仪器左侧下角有一只干燥剂筒,应保持其干燥,发现干燥剂变色应立即更新或烘干后再用。
关于真光光度计,以及真光实验的相关信息分享结束,感谢你的耐心阅读,希望对你有所帮助。
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