dna浓度分光光度计测定

本篇文章给大家分享dna浓度分光光度计测定，以及dna浓度分光光度计测定的原理对应的知识点，希望对各位有所帮助。

简述信息一览：

• 1、如何利用分光光度计测量dna样品的浓度和纯度?还有其他方法?他们之间...
• 2、DNA制品可用哪几种方法测定其含量,试从原理,准确性方面加以比较_百度...
• 3、用紫外可见分光光度法测定某样品
• 4、测定DNA含量用什么方法?
• 5、大片断DNA分子可以用紫外分光光度计测定浓度吗

如何利用分光光度计测量dna样品的浓度和纯度?还有其他方法?他们之间...

1、估计核酸的纯度。纯净DNA的比值为8， RNA为0。若比值高于8说明DNA样品中的RNA尚未除尽，若样品中含有酚和蛋白质将导致比值降低。270nm存在高吸收表明有酚的干扰。 紫外分光光度法只能用于测定浓度大于0.25μg/ml的核酸溶液，对浓度更小的样品，可***用荧光分光光度法。

2、第四步，设置好光度计的测量波长，这就需要熟悉光度计的基本操作，一般测量物质的浓度都是用的标准曲线法，就是对应光度计中的定量测量功能。具体操作时第一步，把仪器的波长调整到我们所需要的波长，例如测量总磷直接把波长走到6***nm，之后放入装好蒸馏水的比色皿到样品室做空白，就是熟称的调零。

3、如果根据紫外线分光光度法，将测到他和她用户这个还是可以有专业的分析师根据籽的这个分析一汽，进行分析。A260nm是核酸最高吸收峰的吸收波长，最佳测量值的范围为0.1至0。

DNA制品可用哪几种方法测定其含量,试从原理,准确性方面加以比较_百度...

1、在DNA浓度为20～200μg/ml范围内，吸光度与DNA浓度成正比，可用比色法测定。在反应液中加入少量乙醛，可以提高反应灵敏度。除DNA外，脱氧木糖，***糖也有同样的反应。其他多数糖类，包括核糖在内，一般无此反应。

2、酚抽提法 酚抽提法是一种常用的植物DNA提取方法。这种方法主要利用酚类化合物如苯酚或三氯甲烷与蛋白质之间的变性作用，使DNA从细胞中释放出来。操作过程涉及细胞的破碎和蛋白质的水解，随后通过离心将酚相和蛋白质去除，从而得到DNA溶液。

3、实时荧光定量PCR技术原理 所谓real-time Q-PCR技术，是指在PCR反应体系中加入荧光基因，利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。

4、二苯胺啡啶溴红（荧光染料）和溴嘧啶都可对DNA染色，原理是卡在分子中，DNA的离心和电泳显色可用它们。 DNA和RNA的鉴别染色 利用吖啶橙的变色特性可鉴别DNA和RNA。吖啶橙作为一种荧光染料已被用于染色固定，非固定细胞核酸，或作溶酶体的一种标记。观察死亡细胞荧光变色性变化以及区别分裂细胞和静止细胞群体。

5、DNaseI足迹实验定义：足迹实验（foot-printing assay），是一种用来检测被特定转录因子蛋白质特异性结合的DNA序列的位置及其核苷酸序列结构的专门实验方法。

6、双缩脲法是第一个用比色法测定蛋白质浓度的方法，硫铵不干扰显色，Cu2+与蛋白质的肽键，以及酪氨酸残基络合，形成紫蓝色络合物，此物在540nm波长处有最大吸收。

用紫外可见分光光度法测定某样品

1、UV-240紫外分光光度计开机预热10min. 用重蒸水洗涤比色皿，吸水纸吸干，加入TE缓冲液后，放入样品室的S池架上，关上盖板。 设定狭缝后校零。 将标准样品和待测样品适当稀释（DNA5μl或RNA4μl用TE缓冲液稀释至1000μl）后，记 录编号和稀释度。

2、第一步，知道你所需要测量物质的特征吸收波长是多少？这个可以在国家标准、行业标准或其他相关标准或方法。例如测量总氮的话，就需要220和275nm这2个波长，所以必须买紫外的光度计，并且最好带双波长测定功能，例如测总磷是6***nm，只需买台可见光度计就可以了。

3、用紫外可见分光光度计可测定物质在紫外光区、可见光区的吸收光谱，并可定量测定。 仪器与试剂仪器 751型分光光度计；1cm石英吸收池一套；50ml容量瓶二只；刻度吸管5ml、10ml各一只；滴管一只。 试剂 苯甲酸标准储备液（1ml相当于0.1mg苯甲酸）；0.1mol/L、0.01mol/L氢氧化钠溶液。

4、***用紫外可见分光光度法测定对乙酰氨基酚片的含量时，可能会受到以下几种因素的干扰： 杂质的干扰：如果样品中含有其他化合物或杂质，可能会干扰对乙酰氨基酚的吸收峰，导致测定结果的准确性受到影响。

测定DNA含量用什么方法?

大于0.25μg/ml的核酸溶液，对浓度更小的样品，可***用荧光分光光度法。试剂与仪器： 提取的质粒DNA，紫外分光光度仪。操作步骤：1） 分光光度计先用水在260nm和280nm两个波长下校零。2） 取质粒DNA样品2μl，用水稀释100倍，转入分光光度计的石英比色杯中。

紫外吸收法也就是测量OD（260）和OD（280）的吸收值，这样的方法其它的杂质对测量结果影响大一点，因为其它杂质在这两个吸收波长也有吸收。

二苯胺显色法是一种常用的测定DNA含量的方法，其优点在于操作简便、快速、灵敏度高，且结果准确可靠。该方法的原理是DNA在酸性条件下可被溴化钾氧化成脱氧核糖，而脱氧核糖在高温碱性条件下与二苯胺反应生成蓝色化合物，通过测定该蓝色化合物的吸光度可计算出DNA的含量。

大片断DNA分子可以用紫外分光光度计测定浓度吗

【答案】：A 由于嘌呤碱与嘧啶碱都具有共轭双键，导致核酸在240～290nm区域内的紫外波段有一强烈的吸收峰，最大吸收值在260nm附近（蛋白质最大吸收值280nm）。

这个，我测DNA浓度的时候只关注两个数值。一，A260/A280，如果在8+—0.2范围内，这就说明提取的DNA还比较纯净。最好是8 二，浓度，37ug/ml就是37ng/ul，如果你是用1ml菌液小提的话，这个是低了很多。

实验步骤 将制备的DNA悬浮溶解于TE缓冲液中[pHO， 1Ommo1/L的Tris缓冲液，内含〈1mmol/L EDTA〉]或悬浮溶解在灭菌水中（依据DNA含量加水）。 用可扫描的紫外分光光度计测定制备的DNA/RNA的紫外吸收曲线，测定OD260和OD280，并计算比值：OD260/OD280，纯DNA的此比值约为8～0。

分光光度计最主要的功能就是浓度测定。比如蛋白质、DNA、RNA、细菌菌液浓度以及其它溶液的浓度测定等等。只要是溶液对光有吸收作用，而其吸收光谱在分光光度计激发光谱的范围内，就可以用它测定。

将纯化的DNA溶液用TE（pH0）稀释至每毫升含5-50μg DNA浓度范围，用TE（pH0）作空白对照，于紫外分光光度计上测定260nm、280nm和230nm吸收值，计算A260/A230和A260/A280的比值，并换算出核酸的含量。

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