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紫外荧光分光光度计

今天给大家分享紫外荧光分光光度计,其中也会对紫外荧光测硫仪原理的内容是什么进行解释。

简述信息一览:

荧光分光光度计原理及结构?

1、荧光分光光度计由氙弧灯发出的光通过切光器使其变成断续之光以及激发光单色器变成单色光后,此光即为荧光物质的激发光,被测的荧光物质在激发光照射下所发出的荧光,经过单色器变成单色荧光后照射于测样品用的光电倍增管上。

2、荧光分光光度计的基本原理是:由高压汞灯或氙灯发出的紫外光和蓝紫光经滤光片照射到样品池中,激发样品中的荧光物质发出荧光,荧光经过滤过和反射后,被光电倍增管所接受,然后以图或数字的形式显示出来。

紫外荧光分光光度计
(图片来源网络,侵删)

3、分光光度计的基本构成是用一个分光器件(棱镜、镜子)把一个光源的光分成两路(确保两个光的波长一致)分别照射在相同的透光容器中的样品(被测)和基准(标准,已知浓度、成分)溶液,然后对比穿过后的光线(对比样品和基准的颜色),即可对样品和基准的一致性做出定性判断(如:是否达标)。

4、分光光度计的基本工作原理是基于物质对光(对光的波长)的吸收具有选择性,不同的物质都有各自的吸收光带。所以,当光色散后的光谱通过某一溶液时,其中某些波长的光线就会被溶液吸收。在一定的波长下,溶液中物质的浓度与光能量减弱的程度有一定的比例关系,即符合比尔定律。

用荧光分光光度计法测定的物质分子中,一般应具有什么

1、分光光度计设置的空白管所装的物质一般具备以下特点:稳定性:空白管中的物质必须具备高度的稳定性,以确保其在整个实验过程中不会发生变化或产生干扰。透明性:为了确保光路畅通,空白管中的物质必须是透明的,这样光才能顺利通过并被检测器接收。

紫外荧光分光光度计
(图片来源网络,侵删)

2、在实际应用中,荧光分光光度计展示了无与伦比的力量。在无机化合物分析中,它与有机试剂联手,能测定约60种元素,如铍、铝等***用荧光法,而氟、硫等则通过荧光熄灭法测定。

3、灵敏度高:荧光分析的最大特点是灵敏度高,通常情况下要***光光度计的灵敏度高出2-3个数量级。选择性强:包括激发光谱和发射光谱,在鉴定物质时,通过选择波长可以使分子荧光分析有多种选择。

4、分子荧光光度法:光电荧光计用滤光片作单色器(激发滤光片和荧光光片),溴钨灯或高压汞灯作光源,光电管为检测器;荧光分光光度计用氙灯作光源、光栅作单色器,光电倍增管为检测器。荧光分光光度计是最常见的实验仪器,主要用于对经光源激发后产生荧光的物质或经化学处理后产生荧光的物质成份分析。

5、与磷光法相比,荧光法的显著优点在于其短的荧光寿命使得在室温下也能快速检测,而磷光法则需要低温环境。荧光定量分析常用朗伯比尔定律,通过工作曲线、比例法或联立方程式来实现。此外,荧光分光光度计作为关键设备,由激发光源、单色器、样品池等组件构成,确保了测量的精确性。

紫外荧光法和化学荧光法的异同

荧光分析法激发态分子经历一个碰撞及发射的去激发过程所发生的能反映出该物质特性的荧光,可以进行定性或定量分析的方法。由于有些物质本身不发射荧光(或荧光很弱),这就需要把不发射荧光的物质转化成能发射荧光的物质。

英文参考 Fluorometry 3 注解 荧光分析法亦称荧光光度分析法,光化学分析法之一。根据被测物质在光照射下所产生的荧光强度来确定其浓度的分析方法。广泛应用于有机化合物的分析,特别对药物在体内代谢的研究,愈来愈多地应用荧光法测定。

磷光的原理:当某种常温物质经某种波长的入射光(通常是紫外线或X射线)照射,吸收光能后进入激发态(通常具有和基态不同的自旋多重度),然后缓慢地退激发并发出比入射光的波长长的出射光。

荧光分光光度计和紫外分光光度计有哪些不同点?

荧光光度计和分光光度计的主要区别在于测量原理和应用领域。荧光光度计是一种用于测量物质发出的荧光光强度的仪器。它基于荧光现象,通过激发样品产生荧光,并测量荧光的强度来分析样品的性质和浓度。荧光光度计通常使用单一波长的激发光源和一个或多个特定波长的检测器来测量荧光信号。

例如紫外分光光度计是测量物质经过紫外激发后物质可以吸收紫外光多少,测量的值是通过物质的光,检测信号与发射信号在一条直线上。而荧光分光光度计是给与一个激发波长后,到达激发态,再发射光,所以检测的是物质发射的光,检测信号与发射器不在一条线上。

分光光度计***用一个可以产生多个波长的光源,通过系列分光装置,从而产生特定波长的光源,光源透过测试的样品后,部分光源被吸收,计算样品的吸光值,从而转化成样品的浓度。

可见分光光度计量程为320nm-1100nm,能满足不同物质的测试。所用的灯不同:(1)紫外分光光度计通常用氢灯或氘灯。(2)可见分光光度计通常***用钨灯或卤钨灯。原理不同:(1)紫外分光光度计根据物质的吸收光谱研究物质的成分,是结构和物质间相互作用的有效手段。

可用光波段不一样,非紫外的不能用紫外波段的光。有些物质的吸收峰值在紫外区,那么中物质只能用紫外的做。

紫外分光光度法和荧光分析法的区别和各自的优缺点?

物质的激发光谱和荧光发射光谱,可以用作该物质的定性分析。当激发光强度、波长、所用溶剂及温度等条件固定时,物质在一定浓度范围内,其发射光强度与溶液中该物质的浓度成正比关系,可以用作定量分析。

因为荧光或磷光分析法是在入射光的直角方向测定荧光强度,即在黑背景下进行检测,因此可以通过入射光强度,或者增大荧光或者磷光信号的放大倍数来提高灵敏度。荧光分析法激发态分子经历一个碰撞及发射的去激发过程所发生的能反映出该物质特性的荧光,可以进行定性或定量分析的方法。

优点:有一定专属性,应用范围广,使用频率高。缺点:准确度不高。

优点是找到对的吸收波长时可快速侦测。缺点是浓度不能太高(最好在mM~μM之间),会有同吸收峰的物质所干扰,而无法得到正确的数据。

紫外分光光度计测的是分子在紫外光区的吸收强度,荧光分光光度计测的是吸收光能量后处于激发态的分子发出的辐射(即分子荧光)。

为什么荧光分光光度计入射光源和检测器的方向是垂直的?

1、如果同紫外光谱仪那样,光源,检测池,检测器处于一直线,光源发出的光可能直接进入检测器,造成很亮的背景,不利于待测物所发荧光的检测。

2、因为荧光是属于由一种某波长的光来激发样品后样品再发出的光,一般来说,样品发出的荧光是很弱的,如果这时候的光路路线和其他像紫外可见或者可见分光光度计一样的话,接收器接收到的光信号基本上是激发光被样品吸收后的信号了,这是因为荧光已经被淹没在激发光了面了。

3、荧光分光光度计的检测器通常放置在入射光的垂直方向,因为这个方向可减少透射光的干扰和影响。荧光检测器(Fluorescence Detector,简称FLD)是高压液相色谱仪常用的一种检测器,用紫外线照射色谱馏分,当试样组分具有荧光性能时,即可检出。

关于紫外荧光分光光度计,以及紫外荧光测硫仪原理的相关信息分享结束,感谢你的耐心阅读,希望对你有所帮助。