分光光度法灵敏度

今天给大家分享分光度计灵敏，其中也会对分光光度法灵敏度的内容是什么进行解释。

简述信息一览：

• 1、为什么测定物质含量的OD值不能超过0.8或者1?
• 2、红外分光光度计怎么校准
• 3、721e紫外分光光度计的灵敏度调整
• 4、使用分光光度计应注意哪些问题
• 5、分光光度计测测定单宁含量时,影响其准确度的因素有哪些?
• 6、分光光度计的正确操作方法是什么?

为什么测定物质含量的OD值不能超过0.8或者1?

1、因为参加显色反应的物质浓度也影响了显色反应后OD值的线性。要搞清楚：使得你的OD值超出线性范围的不是OD值本身过高，而是你加的反应物浓度太高或太低，不能正常显色（虽然颜色可能是对的），超出了显色反应的线性。一般机器OD大于1，线性就不行了。一点经验。

2、都可以。菌太浓的时候就用培养基按倍稀释到2的范围内再测，测完再*倍数。

3、OD值定义：OD值（opticaldensity）表示某一物质在某一个特定波长下的吸光度；ABS是吸光值absorbance的缩写.在分析化学里，某一化学物质都可吸收一定波长的光，并且对光的吸收度与此化学物质的浓度成正比.因此可以利用吸光度的大小来测定某种物质的浓度。

4、ul的培养液对于10的4～5次方的增殖期细胞来说，很难维持68h，如果营养不够的话，细胞会由增殖期渐渐趋向G0期而趋于静止，影响结果，我们是在48h换液的。MTT法只能测定细胞相对数和相对活力，不能测定细胞绝对数。做MTT时，尽量无菌操作，因为细菌也可以导致MTT比色OD值的升高。理论未必都是对的。

5、质控品od值一般在cutoff值的2-3倍OD全称optical density，也就是光密度，也可以称为吸光度。吸光度指的是利用物质特有的吸收光谱，来鉴别物质或者测定物质的含量，也就是将一束特定波长的光通过被检测物，被检测物可以将光吸收掉一部分，通过吸光度计算被检测物的浓度。

红外分光光度计怎么校准

1、打开试样室盖，调节“0”旋钮，使数字显示为“0。00”盖上试样室盖，将比色皿架处于蒸馏水校正位置，使光电管受光，调节透过率“100％”旋钮，使字显示为“100。0”预热后，按（3）连续几次调整“0”和“100％”，紫外分光光度计即可进行测定工作。

2、正确拿取比色皿：手指只能捏住比色皿的毛玻璃面，而不能碰比色皿的光学表面。比色皿的液体容量：液体最好不要超过容积的2/3，以避免液体溢出。对照调零：在使用分光光度计时，一定要进行对照调零，以确保测量结果的准确性。

3、在仪器尚未接通电源时，电表指针必须于“0”刻线上，若不是这种情况，则可以用电表上的校正螺丝进行调节。

721e紫外分光光度计的灵敏度调整

调节波长选择旋钮λ至所需波长，灵敏度调节钮放在“1”位置。调节“0”电位器，校正电表指针指0。将装有参比溶液及待测溶液的比色皿按顺序放入比色架中，使参比溶液处于光路位置，轻轻盖上比色皿暗箱盖，使光电管受光，调节“100%”电位器至电表指针至满刻度（T100%或A=0）处。

型分光光度计的使用方法：检查仪器各调节钮的起始位置是否正确，接通电源开关，打开样品室暗箱盖，使电表指针处于“0”位，预热20min后，再选择须用的单色光波长和相应的放大灵敏度档，用调“0”电位器调整电表为T=0%。

将仪器电源开通，打开比色皿暗箱盖，选择需用的单交波长，灵敏度选择请参照“5”调节“0”电位器使用电表指“0”；然后将比色皿暗箱盖合上，比色皿座处于蒸馏水校正位置，使光电管受光，旋转调“100%”电位器，使电表指针到满度附近，仪器预热20分钟。

在试样量允许时， 试样应选择靠近最佳吸光度值（ 0. 434Ab s ） 的浓度。从理论上讲， 吸光度值为最佳值0. 434Abs 时， 分析误差最小。如果被测试样太浓时， 应向靠近0. 434Ab s 的方向稀释。在不同的吸光度上测试， 相对误差和绝对误差都不同。

可见分光光度计灵敏度旋钮在哪？回答是：722可见分光光度计灵敏度旋钮在，722可见分光光度计按键说明 〈模式〉键 ：工作方式切换键， 上依次显示〔T〕（透射比），〔A〕（吸光度），〔C〕（浓度），〔F〕（计算因子）。 〈100%T〉/〈 〉 键 ：在T模式时为调满度键。

使用分光光度计应注意哪些问题

仪器初次使用或使用较长时间（一年），需检查波长准确度，以确保检测结果的可靠性。长途运输或室内搬运可能造成光源位置偏移，导致亮电流漂移增大。此时对光源位置进行调整，直至达到有关技术指标为止。

该仪器应放在干燥的房间内，使用时放置在坚固平稳的工作台上，室内照明不宜太强。热天时不能用电扇直接向仪器吹风，防止灯泡灯丝发亮不稳定。使用本仪器前，使用者应该首先了解本仪器的结构和工作原理，以及各个操纵旋钮之功能。

注意事项：设备存放的地方要放入一些干燥剂，以免受潮影响使用效果。拿比色皿时，只能捏住比色皿的毛玻璃面，不能碰比色皿的光学表面。比色皿不能用碱溶液或氧化性强的洗涤液洗涤，也不能用毛刷清洗。

分光光度计这种精密的仪器设备对周围的使用环境有比较高的要求，如果环境不当，使用时测量的结果就会不够准确。所以无论在分光光度计的使用或者是存放时多要注意周围的环境，另外日常的维修也是很重要的。

光源的保护：确保光源的稳定性和使用寿命，避免光能不足、杂散光、噪声等问题。同时，定期对光学元件进行清洗和保护，防止腐蚀和损伤。波长的准确性：在操作前，需要确保波长的准确性，以避免测量误差。测量时注意校准：在使用分光光度计进行测量时，需要进行校准，以确保测量的准确性。

【答案】：①在不使用仪器时不要打开光源灯。不进行测量时打开样品室盖，使光门自动关闭，光电管不受光。②经常更换单色器盒的干燥剂，防止色散元件受潮生霉。③比色皿在使用后应立即洗净，为防止其光学窗面被擦伤，必须用擦镜纸或柔软的棉织物擦去水分。④光电元件应避免强光照射或受潮积尘。

分光光度计测测定单宁含量时,影响其准确度的因素有哪些?

1、分光光度计的因素。分光光度计是最终测定甲醛含量的主要仪器，充当判官角色，嗪与酚试剂的氧化产物反应生成蓝绿色化合物，在波长630nm处用分光光度法测定甲醛数值，一般测得最大数值2mg/m，最小数值为0.01mg/m。

2、单波长分光光度法测定含量时对测试溶液和波长应该具有吸光性且具有一定范围。进样一定要准确，测定的波长一定要选择所测主分的最大吸收波长。相应波长范围内不能吸收的不能用该方法测量。不同成分最大吸光波长不同，以便减小误差，被测物质浓度要有一定范围，防止在分光光度计无法测量。

3、如何避免吸光值漂移 读数不稳定可能是实验者最头痛的问题。灵敏度越高的仪器， 表现出的吸光值漂移越大。事实上，分光光度计的设计原理和工作原理，允许吸光值在一定范围内变化，即仪器有一定的准确度和精确度。

分光光度计的正确操作方法是什么?

预热后，开盖用调零旋钮调“0”位，关盖用“100%”旋钮准确调节满度，反复2-3次。依次把空白液、标准液、待测液分别倒入比色皿并放入比色池，以空白液调零和满度后，依次将标准、待测推入光路读出并记录吸光度数值。

型分光光度计的使用方法为：检查仪器各调节钮的起始位置是否正确，接通电源开关，打开样品室暗箱盖，使电表指针处于“0”位，预热20min后，再选择须用的单色光波长和相应的放大灵敏度档，用调“0”电位器调整电表为T=0%。

可见分光光度计使用步骤如下： 打开主机电源，预热仪器。 将样品室内的保护滤光片取下，换上测试所需滤光片。 将光路对准光源，校正波长。 准备测试样品，确保样品均匀且无气泡。 将样品放入样品室，调整样品位置，使测试波长对准光路。 开始测试，记录数据。

关于分光度计灵敏，以及分光光度法灵敏度的相关信息分享结束，感谢你的耐心阅读，希望对你有所帮助。