今天给大家分享分光光度计测量出现负值,其中也会对分光光度计出现负数的原因的内容是什么进行解释。
出现情况这个很正常。两个因素是你的结果出现负值,一是这是因为你做样品中的待测组分含量比较低,二是你在做标准曲线的时候,你标准曲线的各浓度梯度结果不理想,在拟合建立标准曲线的时候没有强制过原点,允许直线有截距。建议你在EXCEL上拟合标准曲线时,强制过原点,可能就不会出现负值了。
检查是否是用对照液调零。检查对照液和待测液的位置是否颠倒。
用可见分光光度计测吸光度时出现负值的原因很可能是进行了错误的操作方法,或是顺序错误,或是操作错误,或是器皿不够干净等等,都会造成出现负值的后果。
然后将波长调整到550nm,这是可以看到绿色的光斑,依次拉动样品杆,检查光斑是否都在比色槽的正中间;最后考虑是不是样品浓度过高,或石英比色皿太脏造成吸光度太大,没办法调,把空的样品槽调100%,然后测石英比色皿的吸光度,低于75%就不能用了。紫外区是不能使用玻璃比色皿的。
测定结果低于测定下限的数据,我们都视为未检出。此时仪器所给出的数据误差极大,自然存在出现负值的情况。当你的样品吸光度低于你调零用的空白样吸光度时,所给出的结果自然就成负值了。
检查是否是用对照液调零。检查对照液和待测液的位置是否颠倒。
负数说明样品的透过率比参比(空白)的透过率还要高,这个需要检查的,第一,看你的比色皿架在测定时有没出现挡住光斑的现象,有的话就需要调整后再测定。
分析:确保不存在操作失误,在相同条件下测定一批不同浓度培养液的吸光值,如果个别样液出现负值,意味着用此方法检测不到你的目的指标。原因是:吸光值与物质的某一特性,在一定的条件(浓度、波长等)下,存在比例关系;若超出条件许可的范围,则不服从朗伯特-比尔定律。
1、最大的可能是你用测试组做空白调零了,也就是说你把空白管与测量管的位置放倒了。两比色杯换个位置试试。另一种可能是试剂本身有问题或空白管与测量管试剂加错了。我们的学生在操作考核时,容易犯类似的错误。
2、仪器光路堵塞:如果分光光度计的光路被污染或堵塞,也可能导致测量出来的数值不准确,甚至出现负数。
3、负数说明样品的透过率比参比(空白)的透过率还要高,这个需要检查的,第一,看你的比色皿架在测定时有没出现挡住光斑的现象,有的话就需要调整后再测定。
4、可能原因较多,仪器本身问题暂且不提,还有可能是在那个吸收峰的范围,溶剂的吸收比你的物质强也会出现负峰。空白对照与样品的位置放反;基线是否测得有问题;比色皿是否洗干净。当然,负值还要看负多少呀。如果很负的值,情况有:空白污染了;装空白的比色皿没有擦拭干净。
5、分光光度计的读数是样品和标准比较的结果。这个过程中的任何环节都可以造成读数出现负值。
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