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光度计样品制备

文章阐述了关于光度计样品制备，以及光度计使用注意事项的信息，欢迎批评指正。

简述信息一览：

可以的，用原子荧光光度计可以用来检测空气、废气中砷、硒等重金属元素的含量是有现成的国家标准《HJ 1133-2020 环境空气和废气颗粒物中砷、硒、铋、锑的测定原子荧光法》。操作过程可以简述如下：按标准取样后，进行试样的制备。

原子荧光光度计的可检测砷 As，铅 Pb，汞 Hg，硒 Se，锗 Ge，锡 Sn，碲 Te，铋 Bi，锑 Sb，镉 Cd，锌Zn ，金Au这十二种元素。百度下一般应用于环境、食品、疾病预防、地质勘探等领域。我们之前为了检测砷、汞，买过一台吉天AFS-933原子荧光光度计。

（图片来源网络，侵删）

因为可以和还原剂反应发生氢化反应的元素有些，所以大部分氢化法原子荧光光度计可检测砷、碲、铋、铅、硒、锑、锡、锌、锗、镉、汞十一种元素。

1、因此在细胞裂解液中加入X的抗体沉淀蛋白X，随后利用蛋白印迹（western blot，WB）检测沉淀中是否存在蛋白Y，如果存在，则说明细胞内存在XY蛋白复合物，即蛋白XY存在相互作用。

2、COIP实验流程主要分为样品制备、实验操作和数据分析三个步骤。样品制备：首先需要准备好待测样品和标准品。将待测样品加入适量的溶剂中，进行适当的处理和稀释，以获得合适的浓度。标准品也需要按照要求稀释。

（图片来源网络，侵删）

3、免疫共沉淀实验过程：细胞裂解：首先需要将细胞或组织裂解释放内部蛋白质，使目标蛋白质能够被识别。抗体偶联：接着需要将一个已知与目标蛋白质相互作用的特定抗体或蛋白A/G浸润到裂解产物中，以便定向提取相互作用的蛋白质。Co-IP：使用分别偶联不同的亲和树脂来捕获不同的蛋白质。

4、简单的说IP就是用抗体把你要的蛋白免疫沉淀下来，然后去检测它。例如蛋白A在细胞内的蛋白量不同，或者有着不同的翻译后修饰，这是可以用A蛋白的抗体+prorein A beads来IP，从细胞中把A拉下，再用特异的抗体（如磷酸化，泛素化抗体）来检测A的变化。

5、鉴定coip特异性：首先需要确定Co-IP是否有特异性，确认共沉淀下来的蛋白质是否只是与目标蛋白物质有相互关系。可以通过WB或MS等技术验证。分析共沉淀蛋白的数量和性质：在Co-IP实验得到的蛋白质电泳图中，共沉淀的蛋白质会在各自的位置上出现。

紫外分光光度法测定苯酚的含量一般可按以下步骤进行：根据实验需要，制备不同浓度的苯酚标准溶液。（如下图所示）使用紫外分光光度计，在适当的波长下（如270 nm）测定各标准溶液的吸光度，并绘制出吸光度与浓度的标准曲线。（如下图所示）取待测样品，将其在相应的波长下测定吸光度。

紫外-可见分光光度计主要由光源、单色器、吸收池、检测器和信号处理器等部件组成。光源的功能是提供足够强度的、稳定的连续光谱。紫外光区通常用氢灯或氘灯.见光区通常用钨灯或卤钨灯。单色器的功能是将光源发出的复合光分解并从中分出所需波长的单色光。色散元件有棱镜和光栅两种。

其数学表达式为：式中的A叫做吸光度；I0为入射辐射强度；I为透过吸收层的辐射强度；（I／I0）称紫藤为透射率T；ε是一个常数，叫做摩尔吸光系数，ε值愈大，分光光度法测定的灵敏度愈高。紫外-可见分光光度计由5个部件组成：①辐射源。

1、【2】在测定吸光度时，第一个比色槽位放入参比溶液的比色皿。

2、比如试管1里你先加了A，又加了B，然后A和B反应生成C和D，你需要检测C的含量，你加入了C的显色剂E。此时，你的参比溶液应该是在试管2加同样量的A和B，再加与E等量的蒸馏水或者去离子水，混匀。就是这个原理，参比就是除了你要测定的东西外其他条件都相同。

3、【】用空白调零后，吸光值不是0而是显示0.001，这是为什么？原因有：仪器不稳定；【】空白溶液里加了1ml的100g/L钼酸铵溶液，用醋酸钠-醋酸缓冲溶液定容到25ml：可以测定此溶液的吸光度。

4、紫外-可见分光光度计。试剂乙酸-乙酸钠缓冲溶液（pH8）称取44gNaAc溶于水中，加入45mLHAc。过滤入1000mL容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。埃利罗青溶液（1g/L）。对硝基苯酚溶液（10g/L）乙醇溶液。抗坏血酸溶液（10g/L）用时现配。

5、这是你还没有完全理解双通道紫外可见分光光度计的原理。其实最根本的原理同普通的分光光度计是一样的，为什么设置双通道，是因为其中一个通道是拿来放空白样的，也可以说是参比样。

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